Антирринум Львиный зев Выращивание из семян Посадка и уход Фото и видео
Львиный зев (Antirrhinum) или антирринум – цветок семейства подорожниковых, род травянистых. Цветок с детства нам знаком под названием «собачка», ведь его цветы походили на разинутую пасть собаки, или даже дракона, поэтому англичане его называли «снэпдрэгон», у французов этот цветок ассоциировался с волчьей пастью, а у украинцев — нежное «ротики».
Хотя в переводе с латинского «антирринум» — сравнение с другой частью лица – «носоподобный», «похожий на нос». Как говорится, у каждого свои фантазии.
Кстати, название «Львиный зев» имеет свои отголоски в греческой мифологии. Когда знаменитый Геракл победил хищного Немейского льва и принес его шкуру царю Евфрисею, тот и взглянуть на нее не захотел. Геракл приспособился шкуру носить как плащ, а шкура то была прямо с головой, пасть была разинута и выглядела очень устрашающе. Богиня Флора восхищалась мужественностью Геракла и в подарок преподнесла ему цветок, в точности напоминающий эту самую пасть.
Как вы понимаете, назывался цветок «Львиный зев».
С тех пор есть в Греции традиция: героя и победителям преподносить букет из этих цветов.
Перенесемся из глубокой древности поближе. Родиной антирринума принято считать Северную Америку, где в дикой природе благоухает пятьдесят видов растений. В Европе прижился один вид – Антирринум большой. С 1567 года немецкие селекционеры начали выводить на его основе новые сорта. На сегодняшний день существует более тысячи (!) культурных сортов львиного зева, различающихся друг от друга по высоте , по цвету, по размеру цветка.
Выращивание рассады антирринума из семян
Рассада антирринума
В более южных районах посадку львиного зева можно производить прямо в грунт с наступлением устойчивого потепления. Не пройдет и трех недель, как семена взойдут. Растение спокойно переживет незначительное похолодание. Но в местах, где возвратные морозы – дело обычное, лучше пользоваться все же рассадным способом, что для цветоводов является делом привычным.
Антирринум посадка и уход фото
Как развивается антирринум в домашних условиях? Вырастить львиный зев рассадным способом просто. Понадобится плоская емкость для рассады, песок, компостная земля , стекло и пульверизатор.
Чуть не забыли, еще семена антирринума
Заниматься этим лучше с 1 по 20 марта. В емкость с дренажными отверстиями засыпаем песок, затем компостную землю, смешанную с эти же песком, разравниваем , прижимаем, увлажняем из пульверизатора. Так как семена очень мелкие, смешиваем их с песком , распределяем по поверхности, присыпаем смесью песка с компостом тонким слоем, снова увлажняем.
Есть способ посева семян по снегу, принесенному с улицы. Снег будет таять и втягивать семена на небольшую, оптимальную для них глубину. Накрыли стеклом и в теплое место (+23˚). Каждый день убираем со стекла конденсат, а землю при необходимости увлажняем. Через две недели появятся первые ростки, теперь надо переместить в полутень, чтобы ростки не вытянулись.
3-4 дня и принимаем стекло.
Антирринум твинни махровый выращивание из семян фото
Поначалу рост будет медленным, нужно поддерживать баланс, чтобы антирринум выращивание из семян перенес нормально:
- чтобы почва была влажной, но не залитой, иначе есть опасность появления «черной ножки». Если сеянец упал, уберите его аккуратно пинцетом и, по возможности, присыпьте место толченым углем (обеззаразить так сказать). Можно перестраховаться: опрыскать рассаду слабым раствором фитоспорина (10 капель на 1 литр воды). После появления пары настоящих листиков – пора пикировать.
- Для пересадки можно использовать индивидуальные горшочки или общий контейнер для рассады (решайте сами, Вам его расставлять на подоконниках, ну если у Вас теплица, тогда гуляем…). Используем легкую смесь из из некислого торфа и дерновой земли (1:2). Через неделю поливаем комплексным удобрением по инструкции.
Видео посев антирринума на рассаду:
Видео как пикировать антирринум:
Постепенно приучаем рассаду к естественным условиям : открываем форточку, выносим на балкон, только избегайте длительных сквозняков. В принципе, крепкая рассада более не подвержена никаким болезням.
Следим , чтобы растение не вытянулось, для этого прищипываем центральный побег после 4-5 листка (следите, чтобы оставшаяся почка смотрела наружу, тогда веточки пойдут наружу, а не внутрь кустика), если боковые побеги развиваются слишком активно, то прищипываем и их.
Посадка антирринума в открытый грунт
Окрепшие и подросшие саженцы высаживаем в открытый грунт в конце весны. Легкое похолодание не принесет им никакого вреда, рассада даже переносит кратковременные заморозки до -3˚.
Почва желательна легкая, в идеале смесь песка, компоста и торфа , РН 6-8. Место можно выбрать как солнечное, так и не очень, главное – не подветренное.
Высокие сорта рассаживают на расстоянии 40 – 50 см друг от друга, более низкие – на расстоянии 30 см, низкорослые – в 20 см друг от друга, а карликовые – на расстоянии 15 см в очень увлажненную почву. Учитываем, что, как только он «переболеет» после пересадки, львиный зев активно пойдет в рост в высоту и в ширину, превращаясь в роскошный кустик.
Какой антирринум любит уход ?
Антирринум махровый твинни пич f1 Antirrhinum nanum Twinny Peach F1 Hybrid
Львиный зев достаточно неприхотливое растение. Просто полить, прорыхлить и вовремя убрать сорняки. Цветок антирринум выращивание переносит практически в любом грунте, но предпочтительны конечно легкие почвы с достаточным запасом органических удобрений и микроэлементов.
Хотя поливать нужно только в засушливое время, не поливают на ночь, а утром, на следующий день после полива обязательно взрыхлить почву.
В засушливое лето растение скорее сбросит листву, чем цветы, так что засуха на цветении почти не отражается. Высокорослые растения подвяжите к опоре, увядшие цветы лучше сорвать, так растение не будет расходовать на них силы и вы придадите более опрятный вид вашей клумбе.
Чтобы добиться длительного цветения…
не позволяйте завязываться семенам, цветоносы удаляем сразу после цветения, срезаем под нижним цветком, тогда львиный зев пустит новые стрелки и продолжит цветение.
Удобрять львиный зев желательно несколько раз: первый — сразу после укоренения нитрофоской и органикой. Перед бутонизацией подкормим второй раз раствором мочевины, сульфата калия и суперфосфата. Достаточно одной столовой ложки каждого средства на ведро воды.
Следует учитывать, что на глинистых или слишком торфяных почвах львиный зев плохо укореняется, поэтому не следует там высаживать высокорослые сорта.
Болезни и вредители
Антирринум f1 махровый Antirrhinum terry
Септоспироз – грибковое заболевание, которое проявляется коричневыми пятнами по листьям, при сильном поражении – скручиванием побегов, отмиранием растений.
Возникает при повышенной влажности, низком проветривании. Сохраняется на растительных остатках. При заражении тщательно уберите зараженные части или все растение и сожгите, опрыскать цветы фунгицидом или медьсодержащими препаратами.
Серая гниль – гриб ботритис – всеядный, поэтому перемещается с одних растений на другие. Поражение проявляется бурыми пятнами на листьях, а при более сильном поражении – налетом серой пудры. Благоприятные условия – повышенная влажность и плохое проветривание, также повышенное содержание азота.
Корневая гниль – это грибковое заболевание, поражающее корневую систему. По виду кажется, что растению не хватает воды. Полив заболевших растений только сделает ситуацию хуже. Сначала убедимся, что корневая система здорова, а почва сухая (копнем на 15 см вглубь). Если корни растения мягкие с неприятным запахом – это корневая гниль. Причина – переувлажнение, заражение от компоста, повторная посадка в инфицированную почву.
Метод борьбы – удалить растение вместе с комом земли.
Можно обработать фунгицидом. Самое главное от этой напасти – нет застою влаги, дренаж, облегчение почвы.
Если заражение слабое, то опрыскиваем бордосской жидкостью или Топазом. При более сильном – Акробат МЦ, Ордан…
Вредители: щитовки, гусеницы, личинки мушек, бабочки, что откладывают личинки
Антирринум крупноцветковый
Видов щитовок очень много, они повсеместно распространены, поражают как плодовые, так и декоративные растения. Питаются соком растения, что приводит к поражению и гибели листа. Насекомые выделяют липкую слизь, на которой развивается сажистый грибок, что ведет к еще большему замедлению развития растения. Щитовки покрыты плотным панцирем, поэтому народными методами бороться с ними достаточно хлопотно: нужно обработать кисточкой самих насекомых спиртовым, мыльным или керосиново- мыльным раствором. Если заражение сильное, то применяем химические препараты разных видов с промежутком в неделю – Адмирал, КЭ, Актара, Актелик…
С гусеницами бороться несложно, обычно здесь их немного (они находят себе что повкуснее в саду и на огороде), поэтому соберите их вручную.
Если же их слишком много, тогда можно опрыскать карбофосом, например, или другим инсектицидом.
Чтобы львиный зев оставался здоровым, надо соблюдать профилактические меры :
- не садить растения слишком близко;
- поливать под корень, а не на листья;
- убирать сорняки;
- вовремя удалять зараженные особи.
Что делать после цветения?
Антирринум большой
Первое, что хочется отметить, понравившиеся растения можно аккуратно выкопать и пересадить в вазон. Если ухаживать и держать при температуре не выше 15˚, то львиный зев будет цвести всю зиму.
Если планируете выращивать многолетний антирринум, то срежьте растение, оставив 5-8 см над землей, прикройте остатки мульчей, чтобы растение легче перезимовало.
Если же львиный зев – однолетний, то следует избежать самосева, срезая отцвевшие стрелки, затем убрать остатки растений, сжечь их, чтобы уничтожить возбудителей болезней и вредителей, а участок перекопать.
Львиный зев может размножаться и самосевом.Ясно, что нужно сохранить несколько цветоносов, семена автоматически дозреют и высеятся из коробочек, а весной взойдут. Просто отметьте место, где был львиный зев, чтобы весной случайно не выполоть всходы.
Когда есть потребность в семенах понравившихся сортов, то поступим так. Оставим стрелки после цветения и соберем их в фазе неполного созревания. Понадобиться длинный бумажный пакет, можно взять в хлебном отделе – для багета. Коробочки вызревают неоднородно – снизу вверх. Совсем зеленую верхушку срезаем, надеваем бумажный пакет на стрелку и завязываем ниже последней коробочки с семенами, срезаем и подвешиваем вверх отверстием. В пакете семена дозреют и высыпятся в пакет. Семена сохраняют всхожесть до трех лет, хранить при температуре 3-5˚ С в сухом месте.
Описание растения Львиный зев или Антирринум
Антирринум фото
Цветок антирринум львиный зев – травянистое растение, иногда полукустарник пирамидальной формы. В зависимости от сорта высота колеблется от 15 см до 1,3 м.
Цветы неправильной формы, двугубые, по сравнению с растением – крупные, бывают простые и махровые. Цветовая гамма — белый, желтый, розовый, все оттенки красного, встречаются двухцветные и даже трехцветные цветы. Уже выведен сорт с сиренево синими цветами («F1 Rocket Orhid»). Семена вызревают в двухгнездых коробочках, очень мелкие – 5000-8000 штук в одном грамме. Цвести львиный зев начинает в июне и продолжает до заморозков.
Антирринум – растение многолетнее, но у нас его чаще возделывают как однолетник, хотя, если постараетесь и Вы и природа, то он взойдет и на будущий год , зацветет пуще прежнего.
Львиный зев выделяется разнообразием сортов, поэтому его можно применить как бордюрное растение (низкорослые сорта), наоборот, более высокорослые сорта – как яркие острова на других почвопокровных растениях. Интересно можно использовать как ампельный цветок для выращивания в подвесных вазонах для украшения беседок, терасс, балконов.
Виды, сорта антирринума
Антирринум ампельный выращивание из семян
Рассмотрим классификацию по высоте растений:
Высокорослые – высота 9-130 см, центральный побег намного выше побегов второго яруса, а третий отсутствует.
Сорта и гибриды:
- Артур – вишневый;
- F1 «Гошенька» – оранжевый;
- F2 – розовый.
Высокие – подходит для срезки, создания каскадных клумб и бордюров, высота 60 -90 см. Срезанный львиный зев может стоять в вазе от недели до двух, самые популярные душистые желтые сорта.
- Анна Герман – светло-розовый;
- Канарейка – лимонно-желтый;
- Мадам Баттерфляй – махровый.
Среднерослые – универсальные сорта высотой 40-60 см. Все побеги примерно одной высоты, используется для клумб и на срезку. Сорта:
- Голден Монарх – классический желтый;
- Руби – насыщенный розовый;
- Липстик силвер – белый с розовым отливом.
Низкие – бордюрные от 25 до 40 см, растет в виде кустика, много побегов второго и третьего порядка.
Популярные сорта антирринума:
Ампельный антирринум лампион f1
- Кримсон велвет – 35 см, густая листва, цветы темные,
бархатно-красные, поздний сорт; - Шнеефлоке – шарообразный компактный кустик, 25-35 см
высотой с более быстрым периодом от посева до цветения. - Лампион – ампельный.
— карликовые (15-20 см) , сильноветвящиеся кустики. Много побегов третьего и четвертого порядка. - Флорал – 13 различных оттенков однотонный и двухтонных. Распространена, как горшечная культура.
- Хоббит – очень распространенный сорт, высотой всего 15 см.
Если вовремя прищепить побеги, то получим аккуратный полусферический кустик. - Том-Тумб – цветки желтые, сорт ранний;
- Цвет Сакуры – розовато-белый.
Существуют и другие классификации львиного зева. Если вы хотите выращивать антирринум для бизнеса, вам будет интересна классификация Сандерсона и Мартина. В срезке львиный зев смотрится восхитительно.
Загрузка…
Антирринум махровый Твинни Роз F1 по цене 111 руб.
Цветы в доме и на участке несут чисто декоративную функцию, однако именно по их внешнему виду и разнообразию сортов можно определить, сколько времени хозяин уделяет своему цветнику.
Интернет-магазин обеспечит всех своих покупателей качественными семенами множества сортов цветов. Вы сможете посадить широко распространенные васильки, астры и бархатцы непривычных расцветок и очень крупных размеров. Бегонию и виолу, интересной ампельной формы. А также малоизвестные, но потрясающе красивые дихондры и делониксы. Различные декоративные смеси превратят самый скучный пейзаж в благоухающий цветущий луг!
Как выбирать цветы?
Чтобы цветник радовал Вас на протяжении всего теплого периода, следует обратить внимание на 3 пункта:
- качество семян;
- способность растения цвести в климате России;
- предназначение цветка.
Решение первых двух пунктов взял на себя, т.к. проверить эти показатели в домашних условиях практически нереально. Магазин работает на рынке уже свыше 12 лет, и все это время держит неизменно высокую планку качества посадочного материала.
Все цветы, представленные на сайте, адаптированы к погодным условиям России, а некоторые цветут круглогодично!
А вот Вам и только Вам нужно определиться с их предназначением. Для украшения террас и балконов выбирайте ампельные формы. Они цветут очень долго и настолько пышно, что практически закрывают собой кашпо. Для больших территорий можно выбрать однолетние смеси и менять цветочный ковер ежегодно. А тем, кто любит постоянство, лучше выбрать двулетники или многолетники, которые каждый сезон будут распускаться и дарить такие любимые краски.
Чтобы цветник был пышным
Чтобы цветник был пышным, на сайте указаны основные моменты посадки и ухода за каждым растением. Однако желательно выполнять и общие правила по выращиванию цветов.
Почва должна быть подготовлена заранее. Удобрения лучше вносить с осени. Для цветов, растущих в контейнерах, можно купить готовые смеси. Следите за уровнем влаги в грунте, особенно в жаркие периоды. Помните, чем мельче тара для цветка, тем чаще его следует поливать.
Если Вы хотите, чтобы цветы распустились как можно раньше, семена нужно сначала прорастить, а потом пересадить на постоянное место. Продлить цветение даже в зимнее время можно, если перенести цветок в теплое место.
Обильное и продолжительное цветение растению обеспечат подкормки. Удаляйте увядшие цветы, это придаст клумбе более аккуратный вид.
Семена Львиный зев махровый Твинни F1, смесь окрасок: описание сорта, фото
Дорогие друзья!
В таком большом ассортименте всевозможных товаров очень легко заблудиться и конечно же так много всего хочется! Но бывает, что нет возможности заказать все сразу.
Чтобы вы не потеряли понравившиеся товары и не тратили время на их поиски, мы создали для вас удобный раздел, где вы можете сохранять понравившиеся вам позиции.
Теперь вы можете составить свой личный «Семейный Сад».
На странице нашего нового раздела у вас есть возможность создать удобные для вас списки, где будут храниться ваши планы на будущие посадки.
Сортируйте товары в списки по цене, культуре, времени посадки, по любому удобному для вас свойству.
Что-то понравилось, но хотите заказать это позже?
Создайте список, сохраните туда выбранные позиции и, когда придет время, нажмите кнопку «все товары в корзину». В правом нижнем углу будет показана общая сумма будущего заказа.
Чтобы начать, воспользуйтесь уже созданным списком «Избранное», сохраняйте в него все понравившиеся вам позиции. Если хотите создать список со своим названием, просто нажмите кнопку «Добавить новый список». Дайте ему любое название, которое вам поможет сориентироваться, например «Семена на 2016 год», «Моя клуба», «Летняя клумба» и др. И когда придет час, в несколько кликов закажите весь необходимы товар, например, для Вашего зимнего сада.
Просматривая теперь подробное описание товара, вы можете нажать кнопку «Добавить в Мой Семейный Сад», и понравившийся товар сохранится в выбранную вами папку.
Легко, быстро, удобно! Приятных покупок!
Как пользоваться разделом Мой Семейный Сад
Для добавления товара в Мой Семейный Сад, необходимо перейти на страницу товара.
Далее необходимо перейти по ссылке Добавить в Мой Семейный Сад.
В появившимся дополнительном окне необходимо выбрать список, в который Вы хотели бы добавить текущий товар. Вы можете выбрать Новый список, задав ему название. После выбора списка необходимо перейти по ссылке «Ок».
Мой Семейный Сад
На странице раздела Вы можете просмотреть все добавленные Вами товары, а также созданные списки.
Отсюда Вы можете положить товар в корзину, как поштучно:
А также весь список:
Также Вы можете удалить товар из выбранного списка:
Или очистить весь список от товаров:
Для полного удаления списка воспользуйтесь следующей ссылкой:
Создавайте списки на различные темы.
Примеры названий могут быть самыми разными: «Моя будущая летняя клумба», «Для дачи», «Яблочный сад» и множество другое. Точно знаете, что закажете из плодово-ягодных саженцев? Так и назовите список «Вкуснотища», добавив туда любимые сорта. И когда придет время, закажите весь список всего в несколько шагов.
Антирринум махровый F1 Твинни Пич
Антирринум махровый F1 Твинни ПичНедоступно для заказа
КупитьСвойства
- Высота взрослого растения 25
- Освещенность Солнце
- Период посадки март-апрель
- Период цветения (урожай) июнь-сентябрь
- Семян в упаковке 20
Описание
Первый гибридный махровый антирринум выращиваемый из семян! — экстремально долго цветущее растение для украшения сада (раннее начало цветения и погибает только с началом значительных заморозков)
ПОЗДНИЙ УДЛИНЕННЫЙ ГИПОКОТИЛ Snapdragon играет двойную роль в активации роста цветков и испускания запаха
клеток.
2019 Aug; 8 (8): 920.
Marta I. Terry
1 Genética Molecular, Instituto de Biotecnología Vegetal, Edificio I + D + I, Plaza del Hospital s / n, Политехнический университет Картахены, 30202 Картахена, Испания
Фернандо Перес-Санс
2 Биомедицинская информационная и биоинформатическая платформа, Институт биомедицинских исследований Мурсии, Университетская клиническая больница «Вирхен-де-ла-Арриксака», Университет Мерсии, 30120 Мерсия, Испания
Педро Х.Наварро
3 Escuela Técnica Superior de Ingeniería de Telecomunicación (DSIE), Campus Muralla del Mar, s / n, Universidad Politécnica de Cartagena, 30202 Cartagena, Spain
Julia Weiss
Vegetal, Edificio I + D + I, Plaza del Hospital s / n, Политехнический университет Картахены, 30202 Картахена, Испания
Маркос Эгеа-Кортинес
1 Genética Molecular, Instituto de Biotecnología Vegetal, Edificio I + D , Plaza del Hospital s / n, Политехнический университет Картахены, 30202 Картахена, Испания
1 Genética Molecular, Instituto de Biotecnología Vegetal, Edificio I + D + I, Plaza del Hospital s / n, Политехнический университет Картахены, 30202 Картахена, Испания
2 Биомедицинская информационная и биоинформатическая платформа, Биомедицинский научно-исследовательский институт Мурсии, Университетская клиническая больница «Вирхен-де-ла-Арриксака», Университет Мерсии , 30120 Мерсия, Испания
3 Escuela Técnica Superior de Ingeniería de Telecomunicación (DSIE), Campus Muralla del Mar, s / n, Universidad Politécnica de Cartagena, 30202 Cartagena, Spain
Получено 17 июля 2019 г .
; Принята в печать 16 августа 2019 г.
Abstract
Циркадные часы растений контролируют большое количество внутренних процессов, включая рост и обмен веществ. У многих видов, таких как львиный зев, испускание запаха имеет циркадный характер. Здесь мы показываем, что устранение LATE ELONGATED HYPOCOTYL в Antirrhinum majus влияет на рост и испускание запаха.Чтобы понять кинетику роста, мы применили феноменальный подход с использованием собственных систем искусственного зрения и получения покадровой видеозаписи. Цветы дикого типа показали более высокую скорость роста, чем растения нокдаун. Максимальная скорость роста была снижена на 22% у растений с более низкой экспрессией LHY . Летучие вещества растений были по-разному затронуты, поскольку растения с РНКи показали повышенную эмиссию соединений, синтезированных из коричной кислоты, и замедленную эмиссию метаболитов бензойной кислоты.
Монотерпены мирцена и оцимена были отложены, тогда как сесквитерпен фарнезен был продвинут. В целом трансгенные линии показали измененный образец испускания летучих и измененный профиль запаха. Наши результаты показывают, что AmLHY играет важную роль в количественном и качественном контроле роста цветков и испускания запаха.
Ключевые слова: antirrhinum, аромат, искусственное зрение, биологический ритм, развитие цветов, скорость роста, феномены, РНК-интерференция, летучие органические соединения
1.Введение
Цветочные органы расположены в виде мутовок чашелистиков, лепестков, тычинок и плодолистиков. Они обретают свою идентичность, когда активируется набор генов, называемых генами идентичности цветочных органов. Эти гены идентичности органов активируют морфогенетическую программу в комбинациях [1]. Гены MADS-BOX DEFICIENS и GLOBOSA образуют белковые комплексы, которые управляют развитием лепестков и тычинок [2,3]. Так называемые гены C-функции участвуют в идентификации органов тычинок и плодолистиков [4] и вызывают прекращение развития меристемы цветков [5,6].
Размер цветочного органа в первую очередь количественно контролируется генами идентичности органа [7,8]. Изменения размера органов цветка происходят за счет изменений времени и / или скорости деления и размножения клеток [9,10]. Боковые органы растут за счет деления и расширения клеток. Несколько генов, контролирующих эти процессы, также играют роль в окончательном размере цветка. Среди них — фактор транскрипции AINTEGUMENTA [1,2,3,4], влияющий как на деление, так и на рост клеток, и фактор EXPANSINS , который в первую очередь контролирует рост клеток [11,12].
Излучение цветочного аромата во многих случаях происходит из тканей лепестков [13] и имеет несколько функций, включая привлечение и направление опылителей и отталкивание вредных насекомых [14,15]. Помимо важной роли выбросов летучих органических соединений (ЛОС) в воспроизводстве и защите растений, общий цветочный букет, воспринимаемый обонятельной системой человека, также имеет эстетическую ценность [16,17].
Цветочные летучие вещества выделяются циркадным образом, и этот факт характеризует некоторые растения как дневные источники излучения, такие как Antirrhinum или розы, или ночные излучающие вещества, такие как Petunia или Silene [18,19,20], что указывает на то, что большинство летучие компоненты выпускаются в течение определенного периода времени.
Циркадные часы широко изучались у Arabidopsis [21]. Исследования циркадных часов у других видов во все большей степени способствуют пониманию генетики циркадных часов у растений и важности их реструктуризации для оптимальной адаптации к окружающей среде [22,23,24]. Расширение клеток контролируется циркадными часами через координацию белков DELLA (аспарагиновая кислота-глутаминовая кислота-лейцин-лейцин-аланин) и факторов транскрипции ФАКТОРА ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ФИТОХРОМА (PIF) [25].Деление клеток также находится под прямым контролем часов посредством связывания TIMING OF CAB 1 с промотором CDC6 у Arabidopsis [26].
Распространение запаха также напрямую контролируется часами. Нокаут LATE ELONGATED HYPOCOTYL ( LHY ) в Petunia вызывает понижающую регуляцию пути бензоид / фенилпропаноид [27], ограничивая время выделения летучих веществ из цветов до вечера. Дополнительное доказательство прямой роли циркадных часов в регуляции испускания цветочного запаха было обнаружено в Nicotiana attuate , где нокдаун LHY или ZEITLUPE вызывает изменения в эмиссии аттрактанта бензилацетона [28].Недавняя работа показала, что ортолог ZEITLUPE в Petunia , PhCHANEL координирует профили запахов [29].
В этой работе мы рассмотрели функцию гена основных часов LHY на развитие цветков в Antirrhinum majus с использованием РНК-интерференции. Используя феноменальный подход, мы проанализировали влияние сбивания AmLHY на рост. Мы также подробно проанализировали функцию AmLHY на испускание запаха.
Наши результаты указывают на нелинейный и сложный контроль процесса синтеза и испускания цветочного аромата с помощью AmLHY .
2. Материалы и методы
2.1. Филогенетический анализ
Мы получили ген AmLHY с помощью BLAST (Basic Local Aligment Search Tool) против набора геномных каркасов с использованием Arabidopsis LHY в качестве запроса. Мы использовали ген близкого родственника из Mimulus gutattus (Migut.N01518.2.p), загруженный из Phytozome, для получения модели кДНК с использованием Genewise [30].Регистрационный номер EMBL-EBI был PRJEB24602.
белковых последовательностей LHY / CCA1 были получены от National for Biotechnology Information (NCBI) с использованием BLASTp (таблица S1). Последовательности белков арабидопсиса REVEILLE (RVE) были использованы в качестве запроса для идентификации этих белков в Antirrhinum majus с помощью программы tblastn и версии 3 генома в базе данных генома Snapdragon (http://bioinfo. sibs.ac.cn/Am /index.php), недавно выпущенный [31]. Выравнивание белков выполняли с помощью CLUSTAL X, интерфейса Windows для программного обеспечения множественного выравнивания последовательностей ClustalW [32].Филогенетические деревья были построены с использованием библиотек R «ape» и «phangorn» [33,34], Максимальное правдоподобие использовалось в качестве статистического метода, а Jones, Taylor and Thornton (JTT) — в качестве модели замены аминокислот [35] с 1000 реплик начальной загрузки. Деревья визуализировались с помощью пакета R «ggtree» [36]. Белковые домены и функциональные сайты были выведены с помощью веб-инструмента PROSITE (https://prosite.expasy.org/) [37], а схематическая структура белков была построена с помощью пакета Bioconductor «drawProteins» [38].Все библиотеки были собраны под R версии 3.5.1.
2.2. Растительный материал и трансформация
Мы использовали плазмиду pHELLSGATE12 [39] для получения конструкции, включающей 156 п.н., начиная с 45 п.н. до предсказанного ATG.
Antirrhinum majus гипокотилей линии Sippe 50 (Max-Planck-Institut für Pflanzenzüchtungsforschung, Кельн, Германия) трансформировали с использованием штамма Agrobacterium tumefaciens EHA105, как описано ранее [8]. Sippe 50 была инбредной линией, которая использовалась для генетического анализа с 1910 года [40,41].Поскольку с тех пор он подвергся самоопылению, он может считаться полностью гомозиготным. Трансгенные растения были подтверждены с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) на основе амплификации гена NPTII . Геномную ДНК выделяли из листьев с помощью набора (NucleoSpin ® Plant II, Düren, Германия). ПЦР проводили с ДНК-полимеразой OneTaq ® (подробности праймеров см. В Таблице S3). Условия ПЦР составляли 30 секунд при 94 ° C, затем 40 циклов по 15 секунд при 94 ° C, 30 секунд при 60 ° C и 30 секунд при 72 ° C и заканчивались через 5 минут при 72 ° C.
A. majus Sippe 50 и трансгенные семена львиного зева проращивали в вермикулите и помещали в камеру для выращивания с условиями цикла 16 часов света / 8 часов темноты при 23/18 ° C в течение дня и ночи, соответственно.
Трансгенные растения детектировали с помощью ПЦР (NEB, One Taq DNA Polymerase, Ипсвич, Массачусетс, США) с использованием праймеров NPTII (Таблица S3). Мы выбрали 3 независимые линии: РНКи: AmLHY14, РНКи: AmLHY26 и РНКи: AmLHY27 . Позже сеянцы переносили в горшки со смесью торфа, вермикулита и перлита 1.1: 1 в теплице в естественных условиях. Наконец, за семь дней до отбора образцов, растения помещали в камеру для выращивания с циклами 12 часов света / 12 часов темноты с температурными циклами 23/18 ° C. Время Zeitgeber 0 (ZT 0) определялось временем включения света.
2.3. Анализ экспрессии генов
Полностью выросшие листья собирали с 3–4 растений с 6-часовыми интервалами в течение полного дня (24 часа). Листья немедленно замораживали в жидком N₂ и хранили при -80 ° C до использования. Тотальную РНК из листьев экстрагировали фенольным методом, как описано в ссылке [42], и обрабатывали ДНКазой I (Fermentas-ThermoFisher, Waltham, MA, USA).
Равные количества тотальной РНК (ThermoFisher, NanoDrop 2000, Waltham, MA, USA) использовали для синтеза кДНК (ThermoFisher, Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit, Waltham, MA, USA). Уровни экспрессии AmLHY анализировали с помощью количественной полимеразной цепной реакции (кПЦР) (система Agilent Mx3000P QPCR, Санта-Клара, Калифорния, США) с SYBR Green (TaKaRa, SYBR Green Master Mix, Кусацу, Сига, Япония) в соответствии с руководствами производителя. и следующий протокол был использован для 40 циклов: 95 ° C в течение 4 минут, а затем цикл при 95 ° C в течение 15 секунд, 60 ° C в течение 15 секунд и 72 ° C в течение 30 секунд. UBIQUITIN ( AmUBQ ) использовали в качестве внутреннего контроля, и образцы были проанализированы в двух экземплярах (таблица S3). Нормализованная экспрессия была выражена как 2 -ΔΔCt , поэтому мы использовали эффективность 2 для анализа данных [43]. Суточная экспрессия гена AmLHY была нормализована по среднему уровню экспрессии во времени; Экспрессия AmLHY в линиях РНКи была нормализована к WT.
Чтобы проверить различия в экспрессии между растениями дикого типа и трансгенными растениями, мы выполнили тест Стьюдента t с использованием пакета stats в R (R версия 3.5.1).
2.4. Измерения цветов
Цветки A. majus Sippe 50 нетрансгенных братьев и сестер и поколения T2 измеряли через 2-3 дня после цветения в соответствии со ссылкой [44]. Цветки отбирали от 3 до 4 разных растений на группу. Всего мы измерили 8 цветков от нетрансгенных братьев и сестер, 9 цветков от RNAi: AmLHY14 , 4 цветков от RNAi: AmLHY26 и 7 цветков от RNAi: AmLHY27 линии. Цветочные параметры сравнивали у нетрансгенных и трансгенных братьев и сестер с помощью теста Стьюдента t , выполненного в R (R версия 3.5.1).
2.5. Анализ роста и искусственное зрение
Мы использовали систему получения изображений, описанную ранее [45,46]. Растения выращивали в камере для выращивания со светодиодным дневным светом, охватывающим от ультрафиолета до красного света.
Ночные изображения получали путем активации инфракрасного света с длиной волны 840 нм в течение коротких интервалов времени (3 с). Изображения были получены с помощью камеры искусственного зрения, содержащей два датчика CCD, многоканальный 24-битный RGB, поглощающий на 610 нм, 540 нм и 460 нм, и монохроматический датчик, захватывающий на 800 нм.Полученные изображения имеют разрешение 1296 × 966 пикселей.
Мы получили данные с использованием периода свет / темнота 12 часов / 12 часов для A. majus Sippe 50 и сегрегационных братьев и сестер RNAi: AmLHY за период 8 дней и 7 часов. Изображения получали каждые 10 минут, всего 1196 изображений, включающих 3 цветка дикого типа и 3 трансгенных цветка. Используя полуавтоматический метод, мы измеряли длину каждые два часа. Кривая была подогнана к необработанным данным с использованием ОБЩЕЙ ДОБАВИТЕЛЬНОЙ МОДЕЛИ (GAM) с использованием пакета «mgcv» от R.Максимальный рост соответствовал максимальному размеру цветков, соответствующему максимальному значению кривой.
Мы получили максимальный наклон, который соответствовал бы максимальной скорости роста, путем вычисления 200 точек кривой и получения наибольшего числа. Площадь под кривой была получена путем интегрирования подобранной кривой с использованием интегративной функции из пакета «stats».
2.6. Сбор летучих, газовая хроматография, масс-спектрометрия и анализ запаха
Были взяты образцы нетрансгенных растений и растений, принадлежащих к поколениям Т2.Три или четыре цветка на линию через 2–3 дня после цветения использовали, как описано ранее [47]. Мы собирали летучие, начиная с ZT3, в течение 6 часов в течение 24 часов. Все растения были акклиматизированы к 12 часам света / 12 часам темноты (12LD) и циклу 18/23 ºC. Уловленные летучие вещества анализировали с помощью газовой хроматографии и масс-спектрометрии (ГХ / МС), как описано в ссылке [8]. Цветочный аромат был проанализирован с помощью пакета R «gcProfileMakeR» (неопубликованные результаты), выбрав частоту 60% и качество по умолчанию.
Количество выбранных летучих было выражено как интегрированная площадь, деленная на свежий вес цветка [48].Фаза рассчитывалась с использованием JTK-CYCLE, реализованного в «MetaCycle» [49] (R версия 3.5.1). Графики были построены с помощью «ggplot2» [50] с использованием удобной для дальтонизма палитры, предоставленной «viridis» [51]. Летучие пути были представлены с помощью программы «PathVisio» (версия 3.3.0) [52].
3. Результаты
3.1. Antirrhinum Majus LHY
Мы получили единственный каркас, который имел высокое сходство с геном LHY из Arabidopsis. Множественное выравнивание последовательностей транслированных белков показало высокий уровень гомологии LHY львиного зева (AmLHY) с другими генами, кодирующими LHY и REVEILLE (RVE) (рисунок S1, таблица S1).Всего мы идентифицировали семь RVEs, генов у львиного зева и один LHY с помощью BLAST, с высоким сходством с Arabidopsis (Таблица S2). Филогенетическая реконструкция с использованием предсказанных белков показала, что кластеры AmLHY с другими белками LHY, и они были четко отделены от клады RVE (Рисунок S1).
Более того, CCA1a и CCA1b из Physcomitrella patens сгруппированы между кладами RVE1 / 2/7 и RVE4 / 8. LHY / CCA1 / RVE (AtLHY, AtCCA1 и AtRVE в Arabidopsis) представляют собой белки MYB, которые характеризуются консервативным ДНК-связывающим доменом [53,54,55]
Мы идентифицировали домен MYB и ДНК-связывающий домен HTH (мотив спираль-поворот-спираль) в AmLHY, которые были высококонсервативными по размеру и положению, как наблюдали у других видов, таких как Petunia или Vigna (Рисунок S1C).Кодирующая область AmLHY отличается от AtLHY. AmLHY показал дополнительные аминокислоты, которые привели к более длинному белку (рис. S2). Как упоминалось выше, мы идентифицировали семь генов, относящихся к семейству RVE у львиного зева, которые имели высокую гомологию с Arabidopsis, за исключением трех генов. Мы не смогли идентифицировать домен MYB в AmRVE1 / 2 / 7A и AmRVE1 / 2 / 7B, в то время как AmRVE1 / 2 / 7D показал два домена MYB (рисунок S1C), что свидетельствует о внутренней дупликации гена.
3.2. AmLHY демонстрирует суточный паттерн экспрессии
Мы проанализировали экспрессию AmLHY в листьях растений дикого типа в рамках цикла 12LD.Мы обнаружили, что экспрессия AmLHY увеличивалась в конце субъективной ночи, достигая пика ранним утром. AmLHY показал устойчивые и значительные колебания (a, p значение = 3,3 × 10 -06 ), как описано для других видов, включая Arabidopsis, вигну или дикий табак [54,56,57]. Мы выбрали растения T1 из трех независимых линий ( РНКи: AmLHY14 , РНКи: AmLHY26 и РНКи: AmLHY27 ). В T2 все выбранные строки отображали значительно более низкий уровень транскрипции AmLHY (b,). RNAi: AmLHY14 продемонстрировал в среднем 90% снижение уровней экспрессии AmLHY , RNAi: AmLHY26 на 65% и, наконец, RNAi: AmLHY27 на 74%.
Экспрессия AmLHY : ( a ) Суточная экспрессия в растениях дикого типа при цикле 12 часов света / 12 часов темноты (12LD); (b ) Экспрессия AmLHY на ZT1.
5 в линиях дикого типа (красный) и трансгенных линиях РНКи: AmLHY14 (зеленый), РНКи: AmLHY26 (синий) и РНКи: AmLHY27 (фиолетовый).Экспрессию определяли методом ΔΔCt с использованием дикого типа в качестве контроля. Контрольный ген был AmUBI . Каждая полоса представляет собой среднее значение ± стандартное отклонение от 3 до 4 биологических повторов.
Таблица 1
Экспрессия AmLHY в линиях дикого типа и РНКи при ZT 1.5. Экспрессия была нормализована по WT. Среднее и стандартное отклонение (SD) представляет от 3 до 4 биологических повторов. Процент нокдауна в линиях РНКи показан в столбце% KD. Различия проверяли с помощью t-критерия Стьюдента; a p -значение <0.05 указывает на значительное понижающее регулирование.
| Группа | Среднее значение | SD | % KD | p -Значение |
|---|---|---|---|---|
| WT | 1 | 0,263 | ||
| RNAi: AmLHY14 | 0,093 | 0,063 | 90,66 | 0,001 |
| RNAi: AmLHY26 | 0,348 | 0,306 | ||
| RNAi: AmLHY27 | 0,256 | 0,178 | 74,44 | 0,003 |
3.
3. AmLHY не влияет на морфологию и размер цветка. Типичный цветок львиного зева имеет пять чашелистиков и пять лепестков, эти лепестки сливаются, образуя трубчатый и симметричный с двух сторон цветок. Мы не наблюдали изменений идентичности органов или аномального роста. Все растения имели полностью раскрытые цветки.
Мы охарактеризовали цветки львиного зева, анализируя 11 цветочных параметров, сравнивая линии Sippe 50 и RNAi: AmLHY дикого типа.Эти измерения включали чашелистики, лепестки и репродуктивные органы. Понижающая регуляция LHY не оказывала значительного влияния на размер цветка, за исключением высоты лепестка, расширения нижнего лепестка и нёба, которое уменьшилось в линии RNAi: AmLHY14 (Рисунок S3, Таблица S4).
3.4. AmLHY увеличивает скорость роста
Изучение мутантов, влияющих на размер цветков у Arabidopsis, Antirrhinum и других видов, в основном полагалось на анализ конечных точек мутантов [10,58].
Очень мало информации о кинетике роста, которая вызывает окончательные изменения в размерах. Изменения в росте, приводящие к различиям в окончательном размере, могут происходить в результате продолжительности периода роста, изменений скорости роста или комбинации обоих параметров. Мы использовали ранее описанную внутреннюю систему искусственного зрения для получения покадровых изображений линии RNAi: AmLHY27 и сестринского брата, разделяющего азиготы (Movie S1). Мы получили кривые роста для диких и трансгенных братьев и сестер, и результаты показали очень сильный эффект понижающей регуляции AmLHY на скорость роста цветков ().Максимальная скорость роста, достигаемая линией РНКи: AmLHY , составляла примерно 78% от нетрансгенного брата, а площадь под моделью кривой роста составляла 73% от нетрансгенного брата (). Максимальный наклон, использованный для расчета скорости роста [59], предполагает, что общая скорость роста составляет всего 51% по сравнению с диким типом.
Насколько мы могли проанализировать, продолжительность периода роста цветков была сходной у WT и у RNAi: AmLHY27 , что указывает на то, что изменение циркадных часов растений влияет на скорость роста лепестков.
Кривая роста, выраженная в мм, цветков нетрансгенных (WT, фиолетовый) и РНКi.AmLHY27 (зеленый). Точки представляют необработанные данные, сплошные линии указывают скорректированную кривую, а пунктирные линии обозначают максимальный наклон, соответствующий максимальной скорости роста.
Таблица 2
Параметры получены из феномного анализа. Максимальный рост соответствует конечному максимуму кривой в мм. Максимальный наклон указывает на скорость роста. Площадь под моделью является оценкой разницы в накопленном росте.
| Группа | Макс. Рост / Станд. Ошибка | Макс. Уклон / Станд. Ошибка | Область |
|---|---|---|---|
| WT | 34,301 / 0,191 | 0,344 / 0,021 | 4892.457 |
| RNAi: AmLHY27 | 27,014 / 0,531 | 27,014 / 0,531 | . AmLHY необходим для производства крупных летучих веществ.
|
Патенты Геномная последовательность гена R1 картофеля как устойчивость к фитофторозу. Кристиан Гебхардт; Франческо Саламини, Агим Баллвора, Джулия Вайс и Мария Эрколано. Max-Planck Gesellschaft. EP / 31.08.01 / EPA 01120670.
Глава 2021 Г. Танг, С. Теотия, Х. Танг, Д. Сингх (ред.) (2021). Технологии на основе РНК для функциональной геномики растений. Концепции и стратегии в науках о растениях. Ссылка 2021 Перес-Санс, Ф.; Ruiz-Hernández, V .; Терри, M.I .; Arce-Gallego, S .; Weiss, J .; Navarro, P.J .; Эгеа-Кортинес, М. (2021) . gcProfileMakeR: пакет R для автоматической классификации конститутивных и неконститутивных метаболитов. Метаболиты , 11, 211. Terry MI, Ruiz-Hernández V, Águila DJ, Weiss J и Egea-Cortines M (2021). Влияние послеуборочных условий на Narcissus sp. Профиль аромата срезанных цветов. Границы растениеводства .11: 540821. DOI: 10.3389 / fpls.2020.540821 Navarro, P.J .; Miller, L .; Gila-Navarro, A .; Díaz-Galián, M.V .; Aguila, D.J .; Эгеа-Кортинес, М. (2021) . 3DeepM: специальная архитектура, основанная на методах глубокого обучения для классификации мультиспектральных изображений. Дистанционное зондирование , 13 , 729. 2020 Андре Мендес Лемос, Нельсон Мачадо, Маркос Эгеа-Кортинес, Ана Изабель Баррос (2020). Оценка параметров качества и фитохимического содержания тридцати клонов винограда «Темпранилло» для улучшения сортов в двух отдельных субрегионах Дору,
Scientia Horticulturae , том 262, 109096, ISSN 0304-4238. Brandoli, C., Petri, C., Egea-Cortines, M. et al. (2020). Ген часов Gigantea 1 из Petunia hybrida координирует вегетативный рост и архитектуру соцветий. Scientific Reports 10 , 275 doi: 10.1038 / s41598-019-57145-9 Brandoli, C .; Петри, С .; Egea-Cortines, M .; Вайс, Дж. (2020). Гигантея: открытие новых функций в развитии цветов. Гены , 11 , 1142. Андре Мендес Лемос, Нельсон Мачадо, Маркос Эгеа-Кортинес, Ана Изабель Баррос (2020) .
Спектроскопия ATR-MIR как инструмент, помогающий процессу отбора клонов «Темпранилло»: определение географического происхождения и года сбора урожая и прогноз энологических параметров,
Пищевая химия ,
Том 325, 126938, ISSN 0308-8146. Мария Виктория Диас-Галиан, Магдалена Торрес, Хосе Давид Санчес-Паган, Педро Х. Наварро, Джулия Вайс, Маркос Эгеа-Кортинес (2020). Повышение урожайности клубники и качества фруктов с помощью синих и красных светодиодов в исследовательских и коммерческих теплицах, Южноафриканский журнал ботаники ,
ISSN 0254-6299, 2019
Диас-Галиан, М.V .; Perez-Sanz, F .; Sanchez-Pagán, J.D .; Weiss, J .; Egea-Cortines, M .; Наварро, П.Дж. (2019). Предлагаемая методология анализа роста и движения растений по феноменальным данным. Дистанционное зондирование. 11 , 2839. Терри, Марта I .; Каррера-Алесина, Марта; Вайс, Юлия; Эгеа-Кортинес, Маркос. 2019. «Транскрипционная структура часов петунии в листьях и лепестках». Гены 10, нет.11: 860. М. И. Терри, Ф. Перес-Санс, П. Дж. Наварро, Дж. Вайс, М. Эгеа-Кортинес. Snapdragon ПОЗДНИЙ УДЛИНЕННЫЙ ГИПОКОТИЛ играет двойную роль в активации роста цветков и испускания запахов. Cells 8 (8), 920 2019. Марсия Карвалью, Исаура Кастро, Хосе Моутинью-Перейра, Карлос Коррейя, Маркос Эгеа-Кортинес, Мануэла Матос, Эдуардо Роса, Вальдемар Карниде, Тереза Лино-Нет. Оценка реакции на стресс у вигны при стрессе засухи. Журнал физиологии растений, том 241, 153001 2019. М.И. Терри, М. Каррера-Алесина, Дж. Вайс, М. Эгеа-Кортинес . Молекулярная и транскрипционная структура циркадных часов лепестков и листьев Petunia hybrida. BioRxiv. Terry MI, Perez-Sanz F, Díaz-Galián MI, Perez de los Cobos F, Navarro PJ, Egea ‐ Cortines M, Weiss, J. (2019) Ген петунии CHANEL — это ортолог ZEITLUPE, координирующий профили роста и запаха . Ячейки 8 (4) 343 . M. Martos-Fuentes, C. Egea-Gilabert, I. Mezaka, J.A. Фернандес, М. Эгеа-Кортинес, Дж. Вайс. (2019). Анализ расстояний между образцами бобовых культур северной и южной Европы с использованием секвенирования следующего поколения выявил несоответствия между географическим и генетическим происхождением, Scientia Horticulturae ,
Том 243,
Страницы 498-505. 2018 Виктория Руис-Эрнандес, Мария Хосе Рока, Маркос Эгеа-Кортинес и Джулия Вайс . (2018) . Сравнение полуколичественных методов, подходящих для определения летучих профилей. Методы растений . 14:67 Ссылка Эгеа-Кортинес, Маркос и Джон Дунан. (2018). Феномика. Frontiers in Plant Sciences 9, 678.
Джулия Вайс, Марта И. Терри, Марина Мартос-Фуэнтес, Лиза Летурнё, Виктория Руис-Эрнандес, Хуан А.Фернандес и Маркос Эгеа-Кортинес (2018). Модель Диля циркадных часов и экспрессии гена запасного белка в листьях и во время заполнения семян у вигны (Vigna unguiculata). BMC Биология растений. 18: 33-53.
Джорджия Нтаци, Маркос Эгеа Гутьеррес-Кортинес, Иоаннис, Карапанос, Ана Баррос, Джулия Вайс, Астрит Баллиу, Эдуардо Аугусто душ Сантуш Роса, Димитриос Саввас (2018). Качество зернобобовых культур в зависимости от факторов, предшествующих уборке урожая. Scientia Horticulturae . 232: 191-205. 2017 Карвалью Марсия, Мария Муньос-Аматриаин, Исаура Кастро, Тереза Лино-Нето, Мануэла Матос, Маркос Эгеа-Кортинес, Эдуардо Роса, Тимоти Клоуз, Вальдемар Карниде (2017) . Сравнение генетического разнообразия вигнового гороха Пиренейского полуострова с местными сортами во всем мире с использованием маркеров SNP высокой плотности. BMC Genomics 18: 891.
Perez-Sanz F, Navarro PJ, Egea-Cortines M (2017). Феномика растений: обзор технологий получения изображений и алгоритмов анализа данных изображений. Gigascience -6: 1–18. Руис-Эрнандес, В., Херманс, Б., Вайс, Дж. И Эгеа-Кортинс, М. (2017) . Генетический анализ естественных вариаций в профилях запаха Antirrhinum идентифицирует БЕНЗОЙНУЮ КИСЛОТУ КАРБОКСИМЕТИЛ ТРАНСФЕРАЗУ как главный локус, контролирующий синтез метилбензоата, Frontiers in plant science 8, 27-40.
2016 Вайс, Дж., Мюлеманн, Дж.К., Руис-Эрнандес, В., Дударева, Н. и Эгеа-Кортинес, М. (2016). «Фенотипическое пространство и вариации профилей цветочного запаха во время позднего развития цветка у Antirrhinum», Frontiers in plant science , 7: 1903. Вайс, Дж., Т. Алькантуд-Родригес, Ракель Токсез и М. Эгеа-Кортинес (2016). Поддержание меристем, пути ауксина, жасмоновой и абсцизовой кислоты как механизм фенотипической пластичности Antirrhinum majus. Научные отчеты 6: 19807. Наварро, П. Дж., Перес, Ф., Вайс, Дж., И Эгеа-Кортинес, М. (2016). Система машинного обучения и компьютерного зрения для сбора и анализа фенотипических данных растений. Датчики (Базель). 16: 641. Бомбарели, Аурелиано; Мозер, Мишель; Амрад, Авичай, Бао, Манжу, Бапауме, Лауре; Барри, Корнелиус; Блик, Маттийс; Боерсма, Мааике; Борги, Лоренцо; Бруггманн, Реми; Бухер, Марсель; Д’Агостино, Нунцио; Дэвис, Кевин; Делледонн, Массимо; Дрюге, Уве; Дударева Наталья; Эгеа-Кортинес, Маркос; Фернандес-Посо, Ноэ; Франкен, Филипп; Грандонт, Лори; Heslop-Harrison, Pat; Хинтше, Дженнифер; Джонс, Митрик; Коэс, Рональд; Lv, Xiaodan; Лайонс, Эрик; Малла, Дива; Мартиноя, Энрико; Маттсон, Нил; Мюллер, Лукас; Мухлеманн, Жоэль; Нури, Ева; Пассери, Валентина; Пеццотти, Марио; Ци, Циньчжоу; Рейнхардт, Дидье; Рич, Мелани; Рихерт-Пёггелер, Катя; Роббинс, Тимоти; Шац, Майкл; Шранц, М; Schuurink, Роберт; Шварцахер, Трюде; Написано, Корнелис; Тан, Хайбао; Урбанус, Сьюзен; Vandenbussche, Michiel; Виджверберг, Китти; Вилларино, Гонсало; Уорнер, Райан; Вайс, Юлия; Юэ, Чжэнь; Зетхоф, Ян; Кватроккио, Франческа, Симс, Томас, Кухлемайер, Крис.(2016). Понимание эволюции пасленовых из родительских геномов Petunia hybrida. Природные растения DOI: 10.1038 / NPLANTS.2016.74
2015 Марта Павлучик, Джулия Вайс, Мэтью Г. Линкс, Микель Эганья Арангурен, Марк Д. Уилкинсон, Маркос Эгеа-Кортинес. (2015). Количественная оценка систематической ошибки при ПЦР-амплификации и секвенировании следующего поколения, полученной на основе образцов метабаркодирования. Аналитическая и биоаналитическая химия. 407: 1841-1848.
2014 Манчадо-Рохо, М., Вайс, Дж. И Эгеа-Кортинс, М. (2014). Проверка Aintegumenta как гена, изменяющего размер цветков декоративных растений. Журнал биотехнологии растений 12 (8): 1053–1065. Руис-Рамон Ф, Агила, Д., Эгеа-Кортинес, М. и Вайс, Дж. (2014). Оптимизация извлечения аромата: дневной свет и возраст цветков влияют на испускание аромата у простых и двойных нарциссов. Промышленные культуры и продукты. 52, 671–78 .
2013 Egea-Cortines Marcos & Weiss, J. (2013). Контроль размера органов растений. eLS. Вайли . Эгеа-Кортинес М., Руис-Рамон Ф., Вайс Дж. (2013). Циркадная регуляция садовых признаков: интеграция сигналов окружающей среды в растениях В: Яник Дж., Изд. Обзоры садоводства, Vol.41: Вайли. Глава 2 Navarro PJ, Fernández C, Weiss J, Egea-Cortines M . (2012). Разработка настраиваемой камеры роста с системой зрения для изучения циркадных ритмов у растений. Датчики 12 , 15356-15375. Антолинос В., Фернандес П.С., Рос-Чумильяс М., Периаго П.М. и Вайс Дж. ( 2012). Разработка подхода на основе плавления с высоким разрешением для эффективной дифференциации изолятов группы Bacillus cereus. Патогены и болезни пищевого происхождения. 9 (9): 777-785 2011 Маллона, Изаскун., Джулия Вайс и Эгеа-Кортинес, Маркос (2011). pcrEfficiency: Веб-инструмент для прогнозирования эффективности ПЦР-амплификации. BMC Bioinformatics.12: 404 2010 Schwarz-Sommer, Zsuzsanna., Thomas Gübitz., Julia Weiss., Perla Gómez di-Marco., Luciana Delgado Benarroch., Andrew Hudson и Marcos Egea-Cortines. (2010). Карта молекулярной рекомбинации Antirrhinum majus . Биология растений BMC . 10: 275 Delgado-Benarroch, L., Weiss, J и Egea-Cortines. (2010). Подбираем цветок.В: Процесс цветения и его контроль у растений: экспрессия генов и взаимодействие гормонов. Редакторы: М. Яиш и Дж. Коласанти. стр-199-216. ISBN-978-81-308-0436-1 Гомес ди Марко П., Паньон М., Эгеа-Кортинес М., Артес Ф., Вайс Дж. (2010). Быстрый молекулярный неразрушающий протокол для оценки аэробной бактериальной нагрузки на свежесрезанный салат . Food Science and Technology International. 16: 409-15 Доменек-Перис, Асунсьон, Конеса-Самора, Пабло., Sahuquillo-Frias Laura., Ortiz-Reina, Sebastián., Moya-Biosca, Joaquín., Acosta-Ortega, Jesús., Pérez-Guillermo, Miguel., Egea-Cortines, Marcos., (2010). Генотипирование ВПЧ в гистологических срезах предшественников поражений карциномы шейки матки: его роль в качестве возможного дополнения для оценки онкогенного потенциала конкретных генотипов ВПЧ. Исследование в прибрежном районе на юго-востоке Испании. Гинекологическое и акушерское обследование . 70: 113-119 Weiss J и Egea-Cortines, M. (2009) Транскриптомный анализ холодовой реакции в плодах томатов идентифицирует дегидрин как маркер для изучения холодового стресса . Журнал прикладной генетики. 50: 311-319 Delgado-Benarroch L, Weiss J, Egea-Cortines M. (2009) Мутанты compacta ähnlich, Nitida и Grandiflora определяют компартменты развития и механизм компенсации в развитии цветков Antirrhinum majus. Журнал исследований растений . 122: 559-69 2008 Renard, Angelique; Гомес ди-Марко, Перла; Эгеа Кортинес, Маркос и Вайс, Джулия. (2008) Применение полногеномной амплификации и количественной ПЦР для обнаружения и количественной оценки порчи дрожжей в апельсиновом соке. Международный журнал пищевой микробиологии . 126: 195-201 Вайс, Джулия и Эгеа Кортинес, Маркос. (2008 г.) . Преподавание прикладной генетики и молекулярной биологии для инженеров сельского хозяйства. Применение Европейской системы кредитных переводов. Международный журнал инженерного образования .33: 59-66 Манчадо-Рохо, Мария; Вайс, Джулия и Эгеа-Кортинес, Маркос. (2008) Использование 23 рДНК для выявления контаминации E. coli в культурах Agrobacterium tumefaciens. Аналитическая биохимия . 372: 253-4 Мария Рос-Чумильяс, Маркос Эгеа-Кортинес, Антонио Лопес-Гомес и Джулия Вайс. (2007) Оценка метода быстрой экстракции ДНК для обнаружения дрожжевых клеток с помощью ПЦР в апельсиновом соке. Контроль пищевых продуктов . 18: 33-39 Вайс Джулия, Мария Рос-Чумильяс, Леандро Пенья и Маркос Эгеа-Кортинес . (2007) Влияние хранения и обработки на стабильность плазмид, дрожжей и геномной ДНК растений в соке из генетически модифицированных апельсинов. Журнал биотехнологии . 128: 194-203 Баллвора, Агим, Мария Эрколано, Джулия Вайс, , Халид Мексем, Кристина Борман, Петра Оберхагеманн, Франческо Саламини и Кристиан Гебхардт. (2002) Ген R1 устойчивости картофеля к фитофторозу (Phytophtora infestans) принадлежит к классу генов устойчивости растений к лейциновой молнии / NBS / LRR. Заводской журнал . 30: 361-72 Предыдущие работы Egea-Cortines Marcos . И Дэвис Брендан. (2000) Beyond the ABCs: формирование тройного комплекса в контроле идентичности органов цветка. Тенденции в науках о растениях 5 (11). 471-76 PDF Egea — CortinesMarcos . Saedler Heinz. Соммер Ганс. Образование тройного комплекса между белками MADS-бокса SQUAMOSA, DEFICIENS и GLOBOSA участвует в контроле цветочной архитектуры Antirrhinum majus. Журнал EMBO . 18 (19). 1999. 5370-5379 PDF Дэвис Брендан. Эгеа — Кортинес Маркос .Де Андраде Сильва Евгения. Saedler Heinz. Соммер Ганс [а]. Множественные взаимодействия между гомеотическими белками MADS-бокса цветков. Журнал EMBO . 15 (16). 1996. 4330-4343. Weiss Julia , Scheinvar Lea, Mizrahi Y. Selenicereus megalanthus (желтая питая). Вьющийся кактус из Колумбии. Журнал кактусов и суккулентов ( США). 67. 1995. 280–283. Weiss Julia .Ботан Авиноам. Мизрахи Йосеф. Требования к цветению и опылению плетистых кактусов с потенциалом плодовых культур . Hortscience. 29 (12). 1994. 1487-1492 Weiss Julia . Ботаник А. Мизрахи Ю. Требования к цветению и опылению у Cereus peruvianus, выращиваемого в Израиле. Израильский журнал растениеводства . 42 (2). 1994. 149-158 Egea — Cortines M.Мизрахи Ю. Влияние дифторметилорнитина на уровни полиаминов в опыленных и индуцированных нафталиноуксусной кислотой молодых плодах томатов. Регламент роста растений . 12 (3). 1993. 287-292. Weiss Julia . Ботаник А. Мизрахи Ю. Вегетативная партенокарпия кактусовой груши Opuntia ficus-indica (L.) Mill. Анналы ботаники (Лондон). 72 (6). 1993. 521-526 Weiss Julia .Ботан Авиноам. Мизрахи Йосеф. Аспекты опыления Hylocereus, кактуса, недавно завезенного в пустыню Негев в Израиле. Hortscience . 28 (5). 1993. 137 Weiss Julia Nerd Avinoam. Мизрахи Йосеф. Формы партенокарпии у Opuntia ficus indica (L.) Mill. Физиология растений (Роквилл). 102 (1 ПРИЛОЖЕНИЕ). 1993. 521-526 Schnyder Hans и Julia Weiss . Рост зерна пшеницы ( Triticum aestivum L ).Значение сроков озеленения. Eur. Дж. Агрон . 2 1993. 93-98 Egea — Cortines Marcos . Коэн Ефрем. Арад Шошана. Bagni Nello. Мизрахи Йосеф. Уровни полиаминов в опыленных и индуцированных ауксином плодах томатов (Lycopersicon esculentum) во время развития. Physiologia Plantarum. 87 (1). 1993. 14-20. Эгеа-Кортинес Маркос . Йосеф Мизрахи. Полиамины в делении клеток, завязывании и развитии плодов и прорастании семян. Р.Д. Слокум и Х. Флорес (ред.). Биохимия и физиология полиаминов растений. CRC Press, Бока-Ратон, Флорида. ISBN 0-8493-6865-0. 1991. 143-159 |
Автоматическая классификация конститутивных и неконституционных метаболитов с помощью gcProfileMakeR
Abstract
Анализ данных в нецелевой метаболомике занимает очень много времени.Генетические факторы и сигналы окружающей среды влияют на состав и количество имеющихся метаболитов, то есть на конститутивные и неконституционные метаболиты. Мы разработали gcProfileMakeR, пакет R, который использует стандартные файлы вывода из GC-MS для автоматического анализа данных с использованием номеров CAS. gcProfileMakeR производит три выхода: основной или конститутивный метаболом, второй список соединений с высококачественным соответствием, которое не является конститутивным, и третий набор соединений с низким качеством, совпадающим с библиотеками MS.В качестве доказательства концепции мы определили испускание цветочного запаха Antirrhinum majus с использованием растений дикого типа, мутантов цветочной идентичности с дефицитом и compacta , а также линий РНКи AmLHY . Утрата идентичности лепестков сопровождалась появлением альдегидов, характерных для летучих профилей зеленых листьев. Снижение уровней AmLHY вызвало значительное увеличение сложности летучих и активировало синтез бензилацетата, отсутствующего у WT. Кроме того, некоторые летучие вещества, выделяемые закрытым образом в WT, такие как метил-3,5-диметоксибезоат или линалоол, стали конститутивными.Используя шестнадцать летучих компонентов конститутивного профиля, все генотипы были классифицированы с помощью машинного обучения с ошибкой 0%. Таким образом, gcProfileMakeR может помочь определить основной и пан-метаболомы. Это повышает качество данных, представленных в метаболомных профилях, поскольку текстовые выходные данные зависят от номеров CAS. Это особенно важно для реализации ЧЕСТНЫХ данных.
Краткое изложение одним предложением gcProfileMakeR позволяет автоматически аннотировать основной метаболом и неконституционные метаболиты, увеличивая скорость и точность ненаправленной метаболомики.
Сноски
-
Информация о финансировании: Эта работа была поддержана Министерством экономики и конкуренции [BFU2017-88300-C2-1R] до [MEC] [JW], [BFU2017-88300-C2-2R] до [ PJN]; Fundación Séneca [19398 / PI / 14] для [MEC] и грант на докторскую степень Министерства образования по культуре и депорте [FPU13 / 03606] для [VRH].
Границы | Влияние послеуборочных условий на Narcissus sp. Срезанные цветы ароматический профиль
Введение
Растения могут производить и выделять большое количество летучих органических соединений (ЛОС).Летучие вещества растений играют несколько сложных ролей в реакции на стресс и химическую коммуникацию, включая отпугивание вредителей, отпугивание травоядных, привлечение опылителей и взаимодействие растений и растений (Jürgens et al., 2000; Matsui, 2006; Niinemets et al., 2013; van Dam и Bouwmeester, 2016). Основные классы летучих соединений включают производные жирных кислот, терпеноиды и бензоиды / фенилпропаноиды, синтезируемые четырьмя основными путями: метилэритритолфосфат, мевалоновая кислота, липоксигеназа и шикимат / фенилаланин (Дударева и др., 2013; Muhlemann et al., 2014; Nagegowda, 2018).
Интересно, что растения выделяют смесь соединений, и их соответствующее количество определяет конкретную ароматическую смесь (Füssel et al., 2007; Weiss et al., 2016). Более того, профили запахов различаются между органами и тканями растений, такими как листья и лепестки, а также между видами, генотипами и даже продолжительностью жизни (Jürgens et al., 2002; Dötterl et al., 2005; Majetic et al., 2014). Кроме того, синтез и выброс летучих соединений зависят от биотических и абиотических факторов (Peñuelas and Llusià, 2001; Loreto and Schnitzler, 2010).Температура влияет на испускание цветочного запаха у различных видов, таких как Petunia, Osmanthus или Lilium (Sagae et al., 2008; Hu et al., 2013; Fu et al., 2017). Это указывает на то, что как условия выращивания, так и поддержание температуры во время послеуборочного периода могут повлиять на фактический профиль аромата. Интенсивность и качество света или спектральное распределение также играют роль в координации испускания запаха (Hu et al., 2013; Chuang et al., 2017). Количество высвобождаемых терпеноидов, спиртов или ароматических соединений увеличивается с увеличением интенсивности света у растений кукурузы и Lilium «Сибирь» (Gouinguené and Turlings, 2002; Hu et al., 2013). По сравнению с белым светом красный и дальний красный свет вызывают повышенное высвобождение фенилпропаноидов / бензеноидов в цветках петунии (Colquhoun et al., 2013).
Сенсорные качества фруктов и срезанных цветов, такие как аромат и вкус, очень важны для потребителей. И аромат, и вкус зависят от генотипа, управления урожаем, методов выращивания, зрелости, но также и послеуборочной обработки. Некоторые методы могут изменить и улучшить качество запаха и содержание сахаров и фенольных соединений.Обработка после сбора урожая включает контролируемую атмосферу (Lopez et al., 2000), УФ-B-облучение (Hagen et al., 2007) и температуру хранения, что широко изучалось в отношении фруктов и овощей. Например, плоды помидора и ананаса демонстрируют более высокое накопление ароматических соединений в виде сложных эфиров и кетонов при повышенных температурах (Maul et al., 2000; Liu and Liu, 2014). Более того, высокая температура не является оптимальной для перевозки на большие расстояния или длительного хранения, которые обычно требуют низких температур и осуществляются в темноте.Низкая температура предотвращает созревание плодов и распространение патогенов, но может привести к переохлаждению и потере вкуса и аромата (Imahori et al., 2008; Weiss and Egea-Cortines, 2009; Tietel et al., 2012).
Срезанные цветы также отправляются и хранятся в измененной атмосфере и / или при низких температурах. Как описано в отношении фруктов и овощей, устойчивость к низким температурам различается у разных видов (Redman et al., 2002). Низкая температура имеет нежелательные эффекты в виде симптомов переохлаждения, включая потерю окраски и уродство цветков (Joyce et al., 2000; Bunya-atichart et al., 2004). В дополнение к этому, неправильная обработка после сбора урожая может изменить ферментативную активность и вторичный метаболизм, влияя на состав летучих ароматических веществ.
Цветочные летучие вещества и их дистиллированные масла из Narcissus sp. важны в парфюмерной и химической промышленности (Remy, 2004). Цветение нарциссов, как и других геофитов, активизируется холодом и цветением зимой в средиземноморской среде (Rees and Wallis, 1970; Rees and Hanks, 1984; González et al., 1998). Правильные послеуборочные технические знания являются ключом к сохранению качества срезанных цветов. Подготовка к уборке урожая также влияет на выход и состав эфирных масел (Perry et al., 1999; Angioni et al., 2006). В последние годы несколько исследователей проанализировали взаимосвязь между окружающей средой и качеством и количеством летучих веществ. Терпены, многочисленная группа ЛОС, демонстрируют положительную корреляцию между испускаемым количеством, температурой и светом (Staudt and Lhoutellier, 2011; Chen et al., 2020). Еще один важный аспект — состав запаха, который изменяется в ответ на высокую температуру и засуху (Haberstroh et al., 2018). Что касается факторов окружающей среды, в нескольких исследованиях рассматривается изменение климата и его возможное влияние на летучие вещества растений (Yuan et al., 2009). Эффект потепления климата, казалось, различается по объемам выбросов, но оказывает заметное влияние на состав запаха (Faubert et al., 2012; Schollert et al., 2015). Изменения в смеси ароматов могут изменить некоторые биологические функции, такие как привлечение опылителей, защита растений или коммуникация между растениями (Farré-Armengol et al., 2013). Таким образом, условия окружающей среды, как до сбора урожая, так и после сбора урожая, играют решающую роль в синтезе и выбросе летучих веществ.
Хотя метаболомные исследования фруктов часто включают полные профили метаболитов, ряд исследований, описывающих воздействие окружающей среды на полные метаболомы цветов, проводился на очень небольшом количестве видов (Verdonk et al., 2003; Cheng et al., 2016). Целью данной работы было определение влияния условий окружающей среды в послеуборочный период на количество и состав Narcissus sp.(Amaryllidaceae) запах. Наши результаты указывают на значительное влияние световых режимов, и особенно температуры, на количество и профили запахов.
Материалы и методы
Заводские материалы и экспериментальный дизайн
Нарцисс (Amaryllidaceae) — группа многолетних луковичных, широко распространенных в бассейне Средиземного моря. Количество видов до сих пор неясно. Наличие нескольких гибридов затрудняет идентификацию видов нарциссов, а также определение их распространения (Santos-Gally et al., 2012; Marques et al., 2017). В Испании описано не менее 25 видов, а также различные гибриды (Aedo and Herrero, 2005). Мы использовали местный сорт сорта Narcissus под названием «махровый цветок», принадлежащий Cooperativa las Cabezuelas (рис. 1A). Первоначально сорт был выделен Матиасом Агила Ногуэра в 1960 году, основателем Las Cabezuelas, и с тех пор воспроизводится луковицами (DÁ, неопубликованное наблюдение). Растения росли как промежуточные культуры между органическими виноградными лозами в Лас-Кабесуэлас (Рисунки 1B, C), расположенном в Альхама-де-Мурсия (Испания), как описано ранее (Ruíz-Ramón et al., 2014). Нарциссы собирали при распускании цветов, совпадающих с распусканием цветков, а срезанные цветы доставляли в лабораторию, где стебли содержали в воде до отбора летучих проб. Поскольку цветки нарциссов имеют короткую продолжительность жизни, мы провели отбор летучих образцов в первые 24–36 часов после сбора урожая. Сбор урожая приходился на момент срезки в поле примерно в 8:30. Цветочные стебли держали на водяных стаканах и приносили в лабораторию в 18:00. Отбор проб проводился зимой 2015 и 2016 гг. Мы отобрали цветы без видимых повреждений.Перед взятием образцов каждый цветок взвешивали и помещали в камеру для выращивания. В исходных условиях цветы выдерживали в камере за 1 ч до внесения первого твистера. Мы собрали летучие вещества в шести различных условиях: четыре анализа были проведены в условиях свет: темнота и два — в постоянной темноте (см. Ниже). Постоянная темнота имитирует условия хранения и / или транспортировки. Зимой (декабрь-февраль) в Альхама-де-Мерсия средняя температура составляет 11,1 ± 5,2 ° C, минимум 4 и максимум 15.7 ° С. Мы решили изучить испускание аромата в диапазоне температур, аналогичных полевым (15-5 ° C), и смоделировать гипотетический теплый зимний день (20-10 ° C). Кроме того, мы также проанализировали влияние постоянной температуры, типичной для послеуборочных условий, на испускание запаха и профиль аромата. Затем были определены следующие экспериментальные условия для сравнения трех пар обработок: во-первых, мы проанализировали испускание запаха при 12-часовом цикле света и 12-часовом темноте (12LD) и двух различных температурных режимах: 20-10 ° C и 15-5. ° C.Самая высокая температура совпадала со световым периодом, а самая низкая температура соответствовала темной фазе. Мы определили группу 12LD и 15-5 ° C как контрольные условия. Второй эксперимент состоял в непрерывной темноте (12DD) и двух термопериодах: 20-10 ° C и 15-5 ° C. Наконец, в последнем эксперименте цветы были отобраны в цикле 12LD с постоянной температурой 20 ° C и 5 ° C соответственно. Для экспериментов свет: темнота мы определили zeitgeber time 0 (ZT0) как время включения света.Для экспериментов с постоянной темнотой мы определили ZT0 как время начала цикла высокой температуры.
Рисунок 1. Цветки Нарцисс sp. «Двойной цветок», использованный в исследовании. (A) Крупный план махрового цветка. (B) Растения в точке сбора урожая. (C) Обзор нарцисса, растущего как промежуточный урожай между органическими виноградными лозами.
Анализ летучих соединений
Для каждого эксперимента мы использовали пять срезанных цветов нарцисса.Один срезанный цветок в течение 24 ч помещали в стакан с 4% -ным раствором сахарозы, который помещали в эксикатор объемом 2 л. Каждый эксикатор состоял из стеклянной емкости, которую мы очищали до и после отбора проб 100% этанолом. Летучие вещества собирали с помощью сорбционной экстракции на магнитной мешалке SBSE, GERSTEL, покрытой полидиметилсилоксаном (PDMS) Twister, поскольку они оптимально поглощают летучие неполярные соединения (Bicchi et al., 2005). Твистеры предварительно кондиционировали, инкубируя при 40 ° C, постепенно повышая температуру до 300 ° C со скоростью 25 ° C / мин и выдерживая при 300 ° C в течение 20 минут.В каждый контейнер мы поместили скрепку, чтобы прикрепить стержень для перемешивания. В качестве отрицательного контроля мы использовали пустые эксикаторы (без срезанных цветов).
Мы проанализировали выброс летучих веществ в различные моменты времени в светлое и темное время суток или субъективно днем и ночью. Две точки времени соответствовали субъективному дню и две — субъективной ночи, ZT0, ZT4, ZT16 и ZT22 для групп с постоянной темнотой и постоянной температурой и ZT4, ZT16, ZT22 и ZT24 для светлой; темной и циклической температуры.Твистеры оставляли в эксикаторах на 2 часа.
Летучие вещества были отделены и идентифицированы, как описано Manchado-Rojo et al. (2012). Вкратце, мы использовали газовый хроматограф 6890, соединенный с инертным масс-селективным детектором 5975 XL (Agilent Technologies) с блоком термодесорбции, охлаждаемой системой инжектора и универсальным пробоотборником (MPS2, GERSTEL). Мы использовали капиллярную колонку HP-5MS (длина 30 м, внутренний диаметр 0,25 мм, пленка 0,25 м) при постоянном давлении, используя гелий в качестве газа-носителя.Температуру повышали с 50 до 70 ° C (5 ° C в минуту), выдерживая 1 мин, а затем повышали до 240 ° C (10 ° C в минуту) и выдерживали 15 минут. Бруски Twister десорбировали, используя начальную температуру от 40 ° C до 150 ° C (100 ° C в минуту) и время выдержки 5 мин. Температура переноса составляла 300 ° C. Десорбированные соединения были криофокусированы на входе охлаждаемой системы инжектора при -100 C. Наконец, летучие вещества были перенесены в колонку путем нагревания входа CIS4 со скоростью 10 ° C сек –1 до 150 ° C с выдержкой. время 3 мин.
В тех случаях, когда у нас не было коммерческих стандартов для правильной идентификации ЛОС, мы предварительно идентифицировали соединения, используя Willey10th-NIST11b (Agilent Technologies, Wilmington, США). Интегрированная площадь пика каждого идентифицированного летучего вещества была нормализована путем деления ее на свежую массу цветка (Ruiz-Hernández et al., 2018).
Анализ данных
Мы сочли, что соединения, которые появляются в более чем 70% повторов, со средним качеством совпадения с библиотекой масс-спектров более 80%, могут рассматриваться как часть конститутивного испускания запаха цветков нарциссов при каждой обработке.Мы получили профили запахов с помощью библиотеки R «gcProfileMakeR» версии 2.2.2 (Pérez-Sanz et al., 2020). Мы установили параметры pFreqCutoff (минимальная частота среза, процент образцов, выделяющих летучие вещества) равным 0,70 и qcutoff (качество соединения, выраженное в процентах) равным 80. Мы также применили начальный фильтр для удаления соединений по их номеру CAS, например силоксаны, которые может происходить из стержней мешалки (Montero et al., 2005; дополнительная таблица 1). Чтобы визуализировать данные, мы классифицировали выбранные соединения в зависимости от их вклада в профиль запаха на две группы.Основные летучие компоненты вносили вклад в профиль запаха более 2%, а оставшиеся соединения составляли группу второстепенных летучих (см. Раздел «Результаты»).
Изучение биогенных летучих веществ может дать большой объем данных. Такие инструменты, как R-библиотека gcProfileMakeR, определяют профиль ядра и неконституционный профиль набора образцов (Pérez-Sanz et al., 2020). Эти профили можно анализировать с помощью методов машинного обучения. Они полезны для выявления изменчивых сигнатур, которые позволяют распознавать различные организмы (Ranganathan and Borges, 2010).Такие алгоритмы, как Random Forest (Breiman, 2001), могут идентифицировать соединения, которые можно использовать для классификации между различными наборами образцов.
Мы использовали алгоритм случайного леса для определения тех летучих веществ, которые можно использовать для классификации различных обработок фотопериода и термопериода (Breiman, 2001). Этот анализ был выполнен с помощью пакета R randomForest (Liaw and Wiener, 2002). Мы объединили все временные точки отбора проб для каждой реплики, фотопериода и термопериода.
Чтобы проанализировать влияние экспериментальных условий и моментов времени отбора проб на количество запахов, мы выполнили тест Крускалла-Уоллиса с последующим тестом Данна в качестве апостериорного анализа , реализованного в пакетах stats и dunn.test (R версия 3.6.1) (Динно, 2017).
Мы использовали анализ главных компонентов (PCA), чтобы изучить различия между экспериментальными методами лечения. Полный набор летучих для каждой точки реплики был использован в качестве входных данных. Анализ был выполнен в R с использованием функции prcomp пакета stats и нанесен на график с помощью ggfortify (Tang et al., 2016).
Результаты
Профили запахов подвержены влиянию фотопериода и термопериода
Срезанные цветы нарцисса имели сложный профиль. Количество соединений, идентифицированных с помощью ГХ-МС, варьировалось в зависимости от условий и дня. Всего мы идентифицировали 73 соединения с качеством выше 80% (дополнительный рисунок 1 и таблица 1). Для каждой экспериментальной группы мы отфильтровали список летучих веществ с помощью библиотеки R «gcProfileMakeR» (Pérez-Sanz et al., 2020). Мы выбрали летучие вещества, выделяемые более чем из 70% образцов, с минимальным качеством 80% для каждого экспериментального условия, обозначив их как составные летучие вещества.Мы получили список из 68 летучих веществ, присутствующих в шести различных экспериментальных условиях. Они были разделены на составляющие, где мы обнаружили 14 летучих органических соединений, и неконституционные, состоящие из 64 летучих органических соединений (рисунок 2 и дополнительный рисунок 1). Минимальное качество мирцена составило 87%. Эти соединения состояли в основном из монотерпенов и фенилпропаноидов (таблица 1). Остальные обнаруженные летучие вещества не являлись составными и были обнаружены менее чем в 70% проб для данных условий окружающей среды (дополнительный рисунок 1).Мы определили группу срезанных цветов, отобранную при 12-часовом освещении: 12-часовую темноту (12LD) и 15-5 ° C в качестве контрольной группы. Это типичные дневные / ночные температуры, наблюдаемые в поле в декабре / январе, когда они цветут (Viti et al., 2010).
Таблица 1. Отдельные летучие органические соединения из срезанных цветов нарцисса.
Рис. 2. Тепловая карта летучих веществ, выделяемых Нарциссом в экспериментальных условиях. Первый столбец показывает номер химического абстрактного сервиса (CAS) летучих веществ.12LD обозначает 12-часовой цикл свет: темнота и 12DD постоянную темноту. Черный цвет указывает на обнаруженное соединение, а белый — на необнаруженное соединение.
Мы обнаружили 13 различных соединений при температуре 12LD и температуре 15-5 ° C (рис. 2). Когда мы сымитировали ситуацию теплой зимы с 12LD и 20-10 ° C, мы обнаружили индол, которого не было в контрольных условиях, в то время как циннамилацетат стал несущественным компонентом профиля (рисунок 2 и дополнительный рисунок 1). . Растения в постоянной темноте (12DD) с термоциклом выделяли 10 ЛОС при 20-10 ° C и 8 летучих при 15-5 ° C.Напротив, цветы при 12LD и постоянной температуре показали меньшую сложность. Мы обнаружили только 8 и 6 летучих веществ при 20 и 5 ° C соответственно. Мы обнаружили наивысшую сложность, определяемую как количество обнаруженных ЛОС, при циклическом освещении и термопериодических условиях.
Поскольку количество обнаруженных соединений варьировалось в зависимости от условий эксперимента, мы выделили четыре группы. В первую группу вошли четыре устойчиво испускаемых соединения, которые были обнаружены независимо от условий освещения или температуры.Это были монотерпены эвкалиптол, линалоол и оцимен, а также бензоид бензилацетат. Таким образом, эти соединения можно рассматривать как общий профиль химического запаха этого сорта Narcissus . Вторая группа содержала 3,4-диметил-2,4,6 октатриен, пинен и бензолпропанол, которые были обнаружены только в условиях смены света и температуры. Монотерпены мирцен и лимонен не были обнаружены при постоянной температуре 5 ° C или 20 ° C (рис. 2). Остальные соединения, индол, фенэтилацетат и пренилацетат, варьировали.Хотя многие соединения появлялись в разных условиях, их количество или вклад варьировались (рис. 2, см. Ниже). Мы можем сделать вывод, что профиль аромата Нарцисса включает набор летучих веществ, устойчиво продуцируемых в различных условиях окружающей среды, второй набор, который требует условий светового цикла, третий набор, который зависит от термопериода, и последний набор с переменным поведением.
Мы исследовали различия в качественных изменениях за периоды выборки, чтобы определить возможные кластеры.Мы использовали PCA в разные моменты времени и сравнили три пары процедур (рис. 3). Два первых основных компонента, PC1 и PC2, объяснили 68,57% вариации (ZT0), 60,51% (ZT4), 57,98% (ZT16), 74,29% (ZT22) и 84,05% (ZT24) (рис. Таблица 2). Группы, отобранные при температурах 12LD / 15-5 ° C, 12DD / 15-5 ° C и 12LD / 5 ° C, показали аналогичную картину и сгруппировались вместе. Напротив, ароматическая смесь нарциссов, отобранная при температуре 12LD и постоянной 20 ° C, отличалась от других групп нарциссов.Мы также наблюдали изменения во времени и условиях. При ZT0 образцы 12DD / 15-5 ° C и 12LD / 5 ° C были похожи и сгруппированы вместе, тогда как 12DD / 20-10 ° C и 12LD / 20 ° C различались. В ZT4 нарциссы при 12LD / 15-5 ° C и 12LD / 20-10 ° C, постоянной темноте и постоянной температуре показали аналогичное распределение. Обработка при постоянной температуре 5 ° C позволила получить чрезвычайно компактный кластер. Он был сосредоточен на большинстве профилей, так как он включает четыре основных летучих компонента, обнаруживаемых при любых условиях. Как упоминалось ранее, на ZT16 и ZT22 все экспериментальные условия показали аналогичную картину, за исключением тех нарциссов, образцы которых были взяты при 12LD и 20 ° C.Наконец, при ZT0 образцы аромата 12LD / 15-5 ° C и 12LD / 20-10 ° C были разными (рис. 3).
Рис. 3. Анализ главных компонентов (PCA) на основе летучих веществ, испускаемых нарциссами, в пяти временных точках (ZT, zeitgeber time) в шести различных условиях освещения: темноты и температуры. LD, светлый: темный; DD, постоянная темнота; ПК, главная составляющая.
Мы обнаружили, что важность каждого летучего вещества (выраженного как факторы нагрузки) для аромата нарцисса менялась в течение дня (дополнительная таблица 2).
Первый главный компонент показал, что наиболее важными летучими веществами были оцимен в ZT0, ZT4, бензилацетат в ZT16 и ZT22 и пинен в ZT24. Летучие лимонен в ZT0 и ZT4, оцимен в ZT16 и ZT24 и фенэтилацетат в ZT22 положительно влияли на PC2 (дополнительная таблица 2). Два из этих летучих веществ, бензилацетат и оцимен, выделялись постоянно. Напротив, пинен отсутствовал в нарциссах, отобранных в постоянной темноте и постоянной температуре, фенэтилацетат не обнаруживался при постоянных 5 ° C, а эмиссия пинена была переменной и обнаруживалась при 12LD / 15-5 ° C, 12LD / 20-10 ° C, и 12DD / 20-10 ° C (рисунок 2).Все эти результаты свидетельствуют о том, что температура, свет и дневное время определяют ароматную смесь срезанных цветов нарцисса, а также характер ее излучения.
Влияние термопериода и фотопериода на количественные изменения в профилях запаха
Вклад каждой летучей в цветочный аромат определяет конкретную ароматическую смесь. Предыдущее исследование охарактеризовало цветочный аромат нескольких видов нарциссов (Dobson et al., 1997). В ароматическом профиле, полученном в настоящей работе, преобладали монотерпены и фенилпропаноиды.Однако также были обнаружены амины и бензоид (рисунок 2 и дополнительный рисунок 1; Ruíz-Ramón et al., 2014). Мы разделили нарциссы на три экспериментальные группы, и каждая группа состояла из двух разных световых: темных и температурных условий, взяв образцы летучих веществ в четырех временных точках. Поскольку мы ожидали увидеть изменения с течением времени, а также среди экспериментальных обработок, мы выполнили два разных анализа. Во-первых, мы проанализировали каждую группу и каждую пару, чтобы определить, увеличился или уменьшился выброс летучих в разное время дня / ночи (Рисунки 4A – F и Таблица 2).Эти данные были преобразованы в журнал.
Рис. 4. Общее ароматическое излучение цветка нарцисси при шести различных световых условиях: темноте и температуре. Летучие вещества отбирали в четырех временных точках (ZT). Чтобы обнаружить паттерны испускания запаха, мы проанализировали каждую группу по времени (A – F) . Мы также сравнили испускаемое количество в шести экспериментальных условиях в каждый момент времени (G) . Каждая полоса представляет собой среднее значение ± стандартное отклонение пяти цветов. Буквы над полосами указывают на различия между временными точками (A – F) и группами (G) (тест Данна, см. Таблицы 2, 3), LD, светлый: темный; DD, сплошной темный; fw, свежий вес.
Таблица 2. Анализ испускания летучих нарциссов в четырех временных точках при различных световых и температурных условиях.
Анализ временных рядов выявил различные модели испускания запаха (Рисунки 4A – F и Таблица 2). В контрольных условиях, 12LD и 15-5 ° C, максимальное выделение запаха происходило в течение светового периода на ZT4 и значительно снижалось ночью (тест Данна p <0,05, фигура 4A). Напротив, при 12LD и 20-10 ° C испускание запаха прогрессивно и значительно увеличивалось в течение светлого-темного периода, показывая обратное (Рисунок 4B).В постоянной темноте и независимо от температурных режимов, эмиссия имела замедленный характер по сравнению с контролем (Рисунки 4C, D). Действительно, контрольная максимальная эмиссия имела место при ZT4, в то время как постоянная темнота достигала максимума при ZT16 и после этого значительно снижалась (тест Данна p <0,05, таблица 2 и фигуры 4C, D). Эмиссия цветков нарциссов, отобранная при постоянной температуре 5 ° C, уменьшалась в полночь (ZT16), тогда как при постоянной 20 ° C испускалась довольно стабильная (Рисунки 4E, F).
Чтобы оценить влияние света и температуры на общее испускание запаха, мы сравнили испускаемое количество в каждый момент времени (рисунок 4G и таблица 3).Мы проанализировали каждую пару экспериментальных условий, например, постоянные 5 и 20 ° C, и сравнили все группы среди них. В ZT0 мы не наблюдали различий между парами нарциссов ( p > 0,05). Кроме того, количество испускаемых веществ в постоянной темноте и постоянной температуре различается, и мы наблюдали самый низкий уровень выбросов при постоянных 5 ° C (Рисунок 4G и Таблица 3). На ZT4 испускаемое количество различается между двумя экспериментальными парами: 12LD / 15-5 ° C и 12LD / 20-10 ° C и постоянные 5 и 20 ° C ( p <0.05). Сравнивая все группы, мы заметили, что цветы ниже 12LD / 20-10 ° C и 12LD / 5 ° C показали наименьшее излучение (Рисунок 4G). Мы наблюдали похожую картину на ZT16. Две группы нарциссов, отобранные при постоянной температуре, показали значительную разницу в количествах выбросов ( p <0,05), тогда как остальные пары не изменились. Когда мы сравнили все группы, мы обнаружили, что самые низкие выбросы соответствовали 12LD / 20-10 ° C и 12LD / 5 ° C, как это наблюдалось на ZT4 (рисунок 4G и таблица 3). На ZT22 мы наблюдали разницу только в паре 12LD / 15-5 ° C и 12LD / 20-10 ° C ( p <0.05, рисунок 4). Кроме того, выбросы при 12LD / 20-10 ° C и 12LD / 20 ° C были выше по сравнению с другими группами (Рисунок 4G и Таблица 3). Наконец, на ZT24 пара, отобранная при температуре LD и цикла, показала значительную разницу между 15-5 ° C и 20-10 ° C, с самым высоким уровнем выбросов при 20-10 ° C (рисунок 4G и таблица 3).
Таблица 3. Анализ испускания летучих нарциссов при различных световых и температурных условиях.
Несмотря на то, что характер излучения менялся от группы к группе (Рисунки 4A – F, см. Выше), образцы нарциссов, отобранные при постоянной температуре, показали важные различия, за исключением ZT0.Эмиссия запаха нарцисса при постоянной 20 ° C была выше, чем при 5 ° C (рисунок 4G и таблица 3).
Можно сделать вывод, что на испускание цветочного аромата сильно влияют температурные режимы у Narcissus , тогда как свет играет меньшую роль.
Влияние термопериода и фотопериода на качественные изменения в профилях запаха
Наблюдаемые изменения в испускании запаха среди групп нарциссов (Рисунок 4G и Таблица 3) могут быть результатом различных моделей испускания (Рисунки 4A – F и Таблица 2), влияния температуры на ферментативную активность, хранение и / или высвобождение ЛОС, но также может быть связано с отсутствием некоторых летучих веществ (Рисунок 1).Мы исследовали испускание каждого летучего вещества и его вклад в запах нарцисса (рис. 5).
Рисунок 5. Суточная эмиссия летучих нарциссов. Каждая полоса представляет собой среднюю эмиссию ± стандартное отклонение пяти цветков в четыре различных момента времени ( zeitgeber time, ZT).
При циклическом освещении и обоих температурных циклах, 15-5 ° C и 20-10 ° C, мы обнаружили первую группу летучих веществ с максимальными выбросами в световой период. К ним относятся 3,4-диметил-2,4,6-октатриен, эвкалиптол и лимонен.Напротив, вторая группа достигла максимального количества ночью. Он включал бензолпропилацетат, бензолпропанол, мирцен и пренилацетат. Другие соединения, такие как оцимен, не следовали четкой схеме. При цикле 15–5 ° C наибольшая эмиссия оцимена происходила в течение светового периода, тогда как при температуре ниже 20–10 ° C это летучее вещество проявляло максимальное количество ночью (рис. 5).
Образцы цветов, отобранные в постоянной темноте с изменяющейся температурой 15-5 ° C и 20-10 ° C, показали две модели.Наибольшее количество индола, бензилацетата, бензолпропилацетата, линалоола и фенэтилацетата было обнаружено при ZT4. Напротив, мы обнаружили наибольшее количество эвкалиптола, лимонена, мирцена, оцимена, циннамилацетата и пренилацетата в течение субъективной ночи при ZT16 и ZT22 (рис. 5).
Как упоминалось выше, мы обнаружили наибольшее количество летучих веществ при цикле свет: темнота и постоянной температуре 20 ° C (рис. 4). Интересно, что максимальное количество всех летучих веществ появляется в темный период, в ZT16 или ZT22.Эта картина была аналогичной при цикле свет: темнота с постоянной температурой 5 ° C. Действительно, выделяемое количество эвкалиптола, линалоола, оцимена и пренилацетата увеличивалось в темный период (рис. 5). Напротив, бензилацетат и фенэтилацетат показали максимальное излучение в течение светового периода. В целом эти результаты показали, что максимальные уровни летучих веществ зависели от времени суток, освещения и температурных условий. Кроме того, образцы нарциссов, отобранные при постоянных 5 ° и 20 ° C, показали меньшее количество летучих по сравнению с контрольной группой (рис. 2).В данном случае казалось, что температура, а не количество выделяемых соединений определяют интенсивность запаха (рисунки 4, 5).
Классификация случайных лесов
Полученные профили запахов сильно различались при разных температурных и световых режимах. Мы исследовали, можно ли с помощью алгоритмов машинного обучения классифицировать расходящиеся профили как разные. Чтобы идентифицировать летучие среди 14 выбранных соединений, которые могут быть полезны для классификации, мы использовали алгоритм случайного леса.Модель правильно классифицировала все образцы, за исключением одного с непрерывной температурой LD 20 ° C, который был классифицирован как непрерывный 5 ° C (Таблица 4). Полученная ошибка выдачи (OOB) составила 3,33%. Этот анализ ранжировал летучие вещества на основе среднего убывающего значения точности (MDA) (Таблица 5). Пятью наиболее важными летучими веществами, которые следует классифицировать между светом, темнотой и температурой, были индол, лимонен, циннамилацетат, мирцен и бензолпропилацетат (таблица 5). Эти результаты подтвердили, что профиль запаха отличался в зависимости от анализируемых условий.Однако, как уже упоминалось выше, постоянные температуры, типичные для послеуборочных условий, вызвали самые резкие изменения в профилях запахов.
Таблица 4. Матрица беспорядка случайного леса, показывающая наблюдаемые и прогнозируемые группы среди световых: темных и температурных циклов.
Таблица 5. Рейтинг важности летучих органических соединений (ЛОС) для классификации нарциссов с помощью алгоритма случайного леса, основанного на средней убывающей точности (MDA).
Обсуждение
Абсолютные выбросы и специфический состав ароматизаторов являются двумя факторами, как для промышленности, так и на экологическом уровне. Действительно, промышленное качество эфирных масел основано на конкретном составе как в качественном, так и в количественном отношении (Nejad Ebrahimi et al., 2008; Nabiha et al., 2009). Ароматическая композиция является важным компонентом разведения декоративных растений, таких как Chrysanthemum или Iris (Sun et al., 2015; Yuan et al., 2019). Поскольку окружающие условия могут влиять на испускание запаха на метаболическом уровне и / или накопление и испарение аромата (Hu et al., 2013; Farré-Armengol et al., 2014; Cna’ani et al., 2015), мы изучили эффект света и температуры на аромате Narcissus .
Излучение запаха также связано с развитием цветка и быстро прекращается при старении цветков (Дударева и др., 2000; Weiss et al., 2016). Поскольку сорт Narcissus , использованный в этом исследовании, показал очень короткую жизнь, нам пришлось провести однодневные тесты.Сложность аромата цветка омелы уменьшается с течением времени его жизни, летучие вещества, такие как нонанал и фарнезен, присутствовали не на всех стадиях цветения. В то же время количество выделяемого оцимена увеличивается в течение жизни цветков (Quintana-Rodríguez et al., 2018). Эти модификации аромата происходят в течение нескольких дней, предполагая изменения в биосинтезе, накоплении и высвобождении летучих, и могут быть учтены при обработке после сбора урожая. Эксперименты на львином зеве и диких родственниках показали стабильный ароматический профиль в течение 3-5 дней, что указывает на наличие генетического компонента, определяющего продолжительность жизни цветков (Weiss et al., 2016). Это также может играть важную роль в испускании и стабильности запаха.
Некоторые цветущие виды, включая розы, львиный зев или табак, демонстрируют устойчивый циркадный ритм (Колосова и др., 2001; Рагусо и др., 2003; Пиконе и др., 2004). Устойчивые колебания циркадного запаха поддерживаются PhLHY, NaZTL, PhCHL, AmLHY и PhGI1 (Fenske et al., 2015; Yon et al., 2015; Terry et al., 2019a, b; Brandoli et al. , 2020). Поскольку координацию циркадного испускания запаха можно рассматривать как нисходящий процесс часов, важно определить, реагируют ли ежедневные изменения в испускании запаха на резкие изменения условий окружающей среды, такие как те, которые используются после сбора урожая, или на естественные изменения при растущих температурах.
Ежедневные изменения в структуре выбросов и количества летучих веществ вызывают изменение цветочного аромата в течение дня (Barman and Mitra, 2019; Terry et al., 2019a, b). Ароматическая смесь играет роль в привлечении опылителей, защите растений и взаимодействии растений с растениями, среди прочего (Heil and Ton, 2008; Schiestl, 2010; Ueda et al., 2012), и изменения аромата могут изменить эти функции. Как сообщалось ранее, аромат нарциссов состоял из монотерпенов, но также из бензоидов и фенилпропаноидов (Dobson et al., 1997; Руиз-Рамон и др., 2014). Наши результаты показали, что изменение условий света: темноты и температуры может кардинально изменить ароматную смесь. Мы идентифицировали 14 летучих органических соединений, четыре из которых, бензилацетат, эвкалиптол, линалоол и оцимен, выделялись постоянно. Срезанные цветы нарцисса также выделяют летучие фенилпропаноиды и бензоиды. Мы можем сделать вывод, что производство как бензоидов, так и монотерпенов устойчиво к изменениям условий окружающей среды, однако не все монотерпены были продуцированы надежно.Действительно, выбросы 3,4-диметил-2,4,6-октатриена, пинена, мирцена и лимонена контролировались светом или температурой. Как наблюдалось в монотерпеновых соединениях, бензилацетат был конститутивным, в то время как все фенилпропаноиды менялись в зависимости от условий окружающей среды. Поскольку пути синтеза монотерпенов являются общими (Dudareva et al., 2003; Byers et al., 2014), а бензоиды и фенилпропаноиды синтезируются из фенилаланина (Boatright et al., 2004), возникает новая гипотеза, что транспорт и / или синтез может быть затронут на определенных этапах биосинтеза.Влияние температуры на испускание запаха у Narcissus , по-видимому, является обычной реакцией у других геофитов.
Подобно терпенам, хранящимся в листьях, цветы могут накапливать несколько летучих соединений, таких как петуния, которая накапливает гликозилированные фенилпропаноиды, которые метаболизируются во время выброса (Cna’ani et al., 2017). Метаболизм фенилпропаноидов, а также его возможное накопление в цветках нарциссов могут объяснить различия в уровнях испускания при различных условиях освещения и температуры.Наши результаты согласуются с результатами, полученными для петунии, за исключением постоянной температуры 20 ° C. Поскольку терпеноиды и фенилпропаноиды демонстрируют расходящиеся паттерны, мы заключаем, что их синтез или испускание могут иметь различную генетическую координацию.
Групповое сравнение температурной и световой обработки показало, что обнаруженные основные различия связаны с постоянными температурами. Действительно, максимумы выбросов менялись от дня к ночи при сравнении 15-5 до 20-10 ° C, что указывает на сильное влияние дневных и ночных температур на общее выделение запахов.Тот факт, что непрерывная темнота не влияет на максимальные выбросы, а постоянные температуры вызывают несколько пологую кривую, указывает на то, что общая температура имеет наибольшее влияние на Narcissus . Было показано, что изменения температуры влияют на количество выделяемых соединений в таких растениях, как Quercus ilex , Sonchus tenerrimus и Lilium sp. (Hu et al., 2013; Farré-Armengol et al., 2014). Эта картина была особенно заметна при постоянной температуре 20 ° C, тогда как наименьшее количество выделяемых ЛОС было обнаружено при постоянной температуре 5 ° C (Рисунок 4).Время максимальной эмиссии при 12LD и 15-5 ° C приходилось на световую фазу, но было отложено до полуночи при 20-10 ° C. Постоянная темнота смещала максимальное излучение к концу темного периода, а при постоянной температуре испускание запаха нарцисса, как правило, достигалось в темную фазу. Эти изменения предполагают, что послеуборочные условия определяют характер эмиссии, указывая на то, что свет и температура также контролируют накопление летучих и, возможно, других вторичных метаболитов. Поскольку промышленные послеуборочные условия обычно имеют фиксированные режимы света и температуры, этот аспект можно решить, чтобы улучшить экстракцию эфирного масла.
Поскольку предуборочные условия важны для аромата цветов, качества и количества эфирных масел (Angioni et al., 2006; Chen et al., 2020), рост в условиях теплого климата может изменить эти свойства. Некоторые исследования предполагают, что температура положительно связана с испусканием летучих веществ (Faubert et al., 2010), включая изменение профиля запаха (Faubert et al., 2012). Однако некоторые виды, по-видимому, имеют стабильные выбросы в изменяющейся среде, например, арктические кустарники Empetrum hermaphroditum и Cassiope tetragona (Schollert et al., 2015). Температура может регулироваться на разных уровнях, включая метаболизм, доступность субстратов, активность ферментов и / или механизмы накопления и высвобождения (Oyama-Okubo et al., 2005; Farré-Armengol et al., 2013; Barman and Mitra, 2019). Это также может зависеть от видов, тканей и органов (Schollert et al., 2015; Jamieson et al., 2017).
Из-за сложности летучести растений методы классификации, такие как анализ главных компонентов или алгоритмы машинного обучения, как случайный лес, полезны для выявления закономерностей и уменьшения количества соединений, которые можно использовать для различения связанных видов или разновидностей, среди других процедур. (Ранганатан и Борхес, 2010; Дос-Сантос и др., 2013; Брюкнер и Хитхофф, 2017). В этом исследовании нарциссы в контрольных условиях выявили более 50 различных идентифицированных соединений с качеством выше 80% (дополнительный рисунок 1). Мы использовали пакет R «gcProfileMakeR», чтобы уменьшить количество соединений (Pérez-Sanz et al., 2020), в зависимости от их частоты, и мы применили алгоритм классификации случайного леса. Случайный лес показал очень низкий уровень ошибок. Только один образец был неправильно классифицирован, что свидетельствует о том, что различия в цветочном аромате между обработками были значительными с математической точки зрения.
Четыре ЛОС, обнаруженные с более высоким уровнем МДА, — это индол, D-лимонен, циннамилацетат и β-мирцен. Эти соединения выделялись по-разному, поскольку индол был обнаружен только в четырех из шести условий, циннамилацетат был обнаружен при 20-10 ° C или 20 ° C, в то время как β-мирцен исчезал при постоянных температурах. Это указывает на возможность обогащения или уменьшения отдельного компонента ароматического профиля путем изменения условий роста и / или хранения.
Наше исследование показало, что температурные режимы изменили испускание запаха на нескольких уровнях, включая ритмическое испускание, количество испускаемого вещества и состав аромата.В целом эти модификации привели к созданию новых смесей ароматов, которые могут быть полезны в декоративной и парфюмерной промышленности. В будущих перспективах следует рассмотреть возможность анализа внутреннего пула летучих веществ, а также активности задействованных ферментов и механизмов испарения.
Представленные данные показывают, что послеуборочные условия влияют на состав и количество аромата, излучаемого цветами нарцисса. Кроме того, в течение дня меняется и состав цветочных букетов. Эти результаты могут быть интересны для парфюмерной и декоративной промышленности.Наши результаты показывают, что поддержание как термопериода, так и фотопериода более целесообразно для сохранения высококачественного профиля аромата. Примечательно, что температура 15-5 ° C с фотопериодом 12:12 LD, напоминающая естественные зимние условия выращивания, может считаться лучшей экологической обработкой для послеуборочных цветков нарцисса с точки зрения профиля аромата.
Заявление о доступности данныхНаборы данных, созданные для этого исследования, доступны по запросу соответствующему автору.
Авторские взносы
MT, VR-H, DÁ, JW и ME-C разработали и разработали эксперименты и исправили рукопись.DÁ предоставила растительный материал. Отобранные и полученные данные MT и VR-H. MT, VR-H и DÁ проанализировали данные. Рукопись написали MT, JW и ME-C. JW и ME-C написали проект и получили финансирование. Все авторы внесли свой вклад в статью и одобрили представленную версию.
Финансирование
Этот вок был профинансирован MICINN-FEDER-BFU-2017-88300-C2-1-R для JW и ME-C.
Конфликт интересов
DÁ является совладельцем Las Cabezuelas Sociedad Cooperativa. Образцы предоставила компания.На результаты, полученные в данной статье, не повлиял какой-либо коммерческий интерес.
Остальные авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.
Дополнительные материалы
Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fpls.2020.540821/full#supplementary-material
Список литературы
Ангиони, А., Барра, А., Коронео, В., Десси, С., и Кабрас, П. (2006). Химический состав, сезонная изменчивость и противогрибковая активность Lavandula stoechas L. ssp. эфирные масла stoechas из стебля / листьев и цветов. J. Agric. Food Chem. 54, 4364–4370. DOI: 10.1021 / jf0603329
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Барман М., Митра А. (2019). Временная взаимосвязь между испускаемыми и эндогенными летучими веществами цветочного аромата у видов Jasminum, цветущих летом и зимой. Physiol. Растение. 166, 946–959. DOI: 10.1111 / ppl.12849
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Бикки К., Кордеро К., Либерто Э., Рубиоло П., Сгорбини Б., Дэвид Ф. и др. (2005). Двухфазные твистеры: новый подход к сорбционной экстракции в свободном пространстве и сорбционной экстракции с мешалкой. J. Chromatogr. А 1094, 9–16. DOI: 10.1016 / j.chroma.2005.07.099
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Боутрайт, Дж., Negre, F., Chen, X., Kish, C.M., Wood, B., Peel, G., et al. (2004). Понимание метаболизма бензоидов in vivo в ткани лепестков петунии. Plant Physiol. 135, 1993–2011. DOI: 10.1104 / стр.104.045468
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Brandoli, C., Petri, C., Egea-Cortines, M., and Weiss, J. (2020). Ген часов Gigantea 1 из Petunia hybrida координирует вегетативный рост и архитектуру соцветий. Sci. Rep. 10, 1–17.DOI: 10.1038 / s41598-019-57145-9
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Брюкнер А., Хитхофф М. (2017). Практическое руководство химиоэкологов по анализу композиционных данных. Химиоэкология 27, 33–46. DOI: 10.1007 / s00049-016-0227-8
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Bunya-atichart, K., Ketsa, S., and van Doorn, W.G. (2004). Послеуборочная физиология цветков Curcuma alismatifolia . Postharvest Biol.Technol. 34, 219–226. DOI: 10.1016 / j.postharvbio.2004.05.009
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Байерс, К. Дж. Р. П., Вела, Дж. П., Пенг, Ф., Риффелл, Дж. А. и Брэдшоу, Х. Д. (2014). Цветочные летучие аллели могут способствовать опосредованной опылителями репродуктивной изоляции у цветков обезьян ( Mimulus ). Plant J. 80, 1031–1042. DOI: 10.1111 / tpj.12702
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Чен, Дж., Тан, Дж., И Ю, X. (2020). Экологический и физиологический контроль суточных и сезонных режимов выбросов биогенных летучих органических соединений от пяти доминирующих древесных пород в полевых условиях. Environ. Загрязнение. 259: 113955. DOI: 10.1016 / j.envpol.2020.113955
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Cheng, S., Fu, X., Mei, X., Zhou, Y., Du, B., Watanabe, N., et al. (2016). Регуляция биосинтеза и эмиссии летучих фенилпропаноидов / бензоидов в цветках петунии × гибридные с помощью множества факторов циркадных часов, света и температуры. Plant Physiol. Biochem. 107, 1–8. DOI: 10.1016 / j.plaphy.2016.05.026
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Chuang, Y.-C., Lee, M.-C., Chang, Y.-L., Chen, W.-H., and Chen, H.-H. (2017). Суточная регуляция испускания цветочного аромата с помощью света и циркадного ритма у орхидей Phalaenopsis . Бот. Stud. 58:50. DOI: 10.1186 / s40529-017-0204-8
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Cna’ani, A., Mühlemann, J. K., Ravid, J., Masci, T., Klempien, A., Nguyen, T. T. H., et al. (2015). На производство цветочного аромата Petunia × hybrida негативно влияют высокотемпературные условия выращивания. Plant Cell Environ. 38, 1333–1346. DOI: 10.1111 / pce.12486
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Cna’ani, A., Shavit, R., Ravid, J., Aravena-Calvo, J., Skaliter, O., Masci, T., et al. (2017). Ароматические соединения фенилпропаноидов в петунии x гибридной гликозилированы и накапливаются в вакуолях. Фронт. Plant Sci. 8: 1898. DOI: 10.3389 / fpls.2017.01898
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Колкухун, Т. А., Швитерман, М. Л., Гилберт, Дж. Л., Яворски, Э. А., Лангер, К. М., Джонс, К. Р. и др. (2013). Легкая модуляция летучих органических соединений из цветков петунии и избранных фруктов. Postharvest Biol. Technol. 86, 37–44. DOI: 10.1016 / j.postharvbio.2013.06.013
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Добсон, Х.Э. М., Арройо, Дж., Бергстрём, Г., и Грот, И. (1997). Межвидовая изменчивость цветочных ароматов в пределах рода Нарцисс (Amaryllidaceae). Biochem. Syst. Ecol. 25, 685–706. DOI: 10.1016 / S0305-1978 (97) 00059-8
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Дос-Сантос, Н., Буэсо, М. К., и Фернандес-Трухильо, Дж. П. (2013). Летучие ароматические вещества как биомаркеры текстурных различий при сборе урожая в неклимактерических почти изогенных линиях дыни. Food Res.Int. 54, 1801–1812. DOI: 10.1016 / j.foodres.2013.09.031
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Dötterl, S., Wolfe, L.M., and Jürgens, A. (2005). Качественный и количественный анализ цветочного аромата Silene latifolia . Фитохимия 66, 203–213. DOI: 10.1016 / j.phytochem.2004.12.002
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Дударева Н., Клемпиен А., Мухлеманн Дж. К. и Каплан И. (2013). Биосинтез, функции и метаболическая инженерия летучих органических соединений растений. New Phytol. 198, 16–32. DOI: 10.1111 / nph.12145
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Дударева Н., Мартин Д., Киш, К. М., Колосова, Н., Горенштейн, Н., Фелдт, Дж. И др. (2003). (E) -β-оцимен и гены мирценсинтазы биосинтеза цветочного запаха у львиного зева. Растительная клетка 15, 1227–1241. DOI: 10.1105 / tpc.011015
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Дударева Н., Мурфитт Л.М., Манн, К.Дж., Горенштейн, Н., Колосова, Н., Киш, К.М. и др. (2000). Регуляция развития биосинтеза и эмиссии метилбензоата в цветках львиного зева. Растительная клетка 12, 949–961. DOI: 10.1105 / tpc.12.6.949
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Фарре-Арменгол, Г., Филелла, И., Ллусия, Дж., И Пеньуэлас, Дж. (2013). Летучие органические соединения цветов: между привлекательностью и отпугиванием посетителей в условиях глобальных изменений Перспектива.Завод Ecol. Evol. Syst. 15, 56–67. DOI: 10.1016 / j.ppees.2012.12.002
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Фарре-Арменгол, Г., Филелла, И., Ллусиа, Дж., И Ниинеметс, Ю., и Пеньуэлас, Дж. (2014). Изменения в цветочных букетах из-за специфической реакции соединения на повышение температуры. Global Change Biol. 20, 3660–3669. DOI: 10.1111 / gcb.12628
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Фобер, П., Тийва, П., Михельсен, А., Риннан, Э, Ро-Поулсен, Х., Риннан, Р. (2012). Сдвиг в видовом составе растений в субарктической подстилке березовых лесов из-за изменения климата приведет к изменению профиля выбросов биогенных летучих органических соединений. Почва растений 352, 199–215. DOI: 10.1007 / s11104-011-0989-2
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Фауберт П., Тиива П., Риннан Э., Михельсен А., Холопайнен Дж. К. и Риннан Р. (2010). Удвоение выбросов летучих органических соединений из субарктической тундры при моделировании потепления климата. New Phytol. 187, 199–208. DOI: 10.1111 / j.1469-8137.2010.03270.x
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Фенске, М. П., Хазелтон, К. Д. Х., Хэмптон, А. К., Шим, Дж. С., Ямамото, Б. М., Риффелл, Дж. А. и др. (2015). Ген циркадных часов LATE ELONGATED HYPOCOTYL непосредственно регулирует время испускания цветочного запаха в петунии . Proc. Natl. Акад. Sci. США 112, 9775–9780. DOI: 10.1073 / pnas.1422875112
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Фу, Дж., Хоу, Д., Чжан, К., Бао, З., Чжао, Х., Ху, С. (2017). Излучение цветочного аромата четырех сортов Osmanthus Fragrans в ответ на различные температуры. Молекулы 22: 430. DOI: 10.3390 / молекулы22030430
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Füssel, U., Dötterl, S., Jürgens, A., and Aas, G. (2007). Межвидовые и внутривидовые вариации цветочного аромата у представителей рода Salix и их значение для опыления. J. Chem. Ecol. 33, 749–765. DOI: 10.1007 / s10886-007-9257-6
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Гонсалес, А., Баньон, С., Фернандес, Дж. А., Франко, Дж. А., Касас, Дж. Л. и Очоа, Дж. (1998). Ответы цветения Gladiolus tristis (L.) после обработки клубнелуковиц холодом. Sci. Hortic. 74, 279–284. DOI: 10.1016 / S0304-4238 (98) 00092-2
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Gouinguené, S.П., и Терлингс, Т. К. Дж. (2002). Влияние абиотических факторов на индуцированные выбросы летучих веществ в растениях кукурузы. Plant Physiol. 129, 1296–1307. DOI: 10.1104 / pp.001941
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Haberstroh, S., Kreuzwieser, J., Lobo-do-Vale, R., Caldeira, M.C., Dubbert, M., and Werner, C. (2018). Выбросы терпеноидов двух средиземноморских древесных пород в ответ на стресс, вызванный засухой. Фронт. Plant Sci. 9: 1071. DOI: 10.3389 / fpls.2018.01071
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Hagen, S. F., Borge, G. I. A., Bengtsson, G. B., Bilger, W., Berge, A., Haffner, K., et al. (2007). Фенольное содержание и другие полезные для здоровья и сенсорные свойства плодов яблони ( Malus domestica Borkh., Cv. Aroma): эффект послеуборочного УФ-B-облучения. Postharvest Biol. Technol. 45, 1–10. DOI: 10.1016 / j.postharvbio.2007.02.002
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Ху, З., Чжан, Х., Ленг, П., Чжао, Дж., Ван, В. и Ван, С. (2013). Излучение цветочного аромата Lilium «siberia» в ответ на интенсивность света и температуру. Acta Physiol. Завод 35, 1691–1700. DOI: 10.1007 / s11738-012-1211-8
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Имахори Ю., Такемура М. и Бай Дж. (2008). Окислительный стресс, вызванный переохлаждением, и антиоксидантная реакция плодов муми ( Prunus mume ) при хранении при низкой температуре. Postharvest Biol.Technol. 49, 54–60. DOI: 10.1016 / j.postharvbio.2007.10.017
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Джеймисон, М.А., Беркл, Л.А., Мэнсон, Дж. С., Руньон, Дж. Б., Троубридж, А. М., и Зиентек, Дж. (2017). Влияние глобальных изменений на взаимодействие растений и насекомых: роль фитохимии. Curr. Opin. Insect Sci. 23, 70–80. DOI: 10.1016 / j.cois.2017.07.009
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Джойс, Д. К., Меара, С.А., Хетерингтон, С. Э., и Джонс, П. (2000). Воздействие холодного хранения на срезанные соцветия Grevillea ‘Sylvia’. Postharvest Biol. Technol. 18, 49–56. DOI: 10.1016 / S0925-5214 (99) 00059-9
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Юргенс А., Уэббер А. К. и Готтсбергер Г. (2000). Цветочные ароматические соединения видов амазонских Annonaceae, опыляемых мелкими жуками и трипсами. Фитохимия 55, 551–558. DOI: 10.1016 / S0031-9422 (00) 00241-7
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Юргенс, А., Витт, Т., и Готтсбергер, Г. (2002). Цветочная композиция аромата у видов Silene, цветущих ночью (Caryophyllaceae). Biochem. Syst. Ecol. 30, 383–397. DOI: 10.1016 / S0305-1978 (01) 00106-5
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Колосова Н., Горенштейн Н., Киш С. М., Дударева Н. (2001). Регулирование циркадной эмиссии метилбензоата у растений, выделяющих суточные и ночные выбросы. Растительная клетка 13, 2333–2347. DOI: 10.1105 / tpc.010162
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Лиав, А.и Винер М. (2002). Классификация и регрессия методом randomForest. R News 2, 18–22.
Google Scholar
Лю, К., и Лю, Ю. (2014). Влияние повышенной температуры после сбора урожая на цвет, физико-химические характеристики и ароматические компоненты плодов ананаса. J. Food Sci. 79, C2409 – C2414. DOI: 10.1111 / 1750-3841.12688
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Лопес, М. Л., Лавилла, М. Т., Рекасенс, И., Грэлл, Дж., И Вендрелл, М. (2000). Изменение качества аромата яблок «Голден Делишес» после хранения при различных концентрациях кислорода и углекислого газа. J. Sci. Продовольственное сельское хозяйство. 80, 311–324. DOI: 10.1002 / 1097-0010 (200002) 80: 3 <311 :: aid-jsfa519> 3.0.co; 2-f
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Majetic, C.J., Levin, D.A., and Raguso, R.A. (2014). Расхождение в профилях цветочного аромата среди культурных видов флоксов и внутри них. Sci. Hortic. 172, 285–291. DOI: 10.1016 / j.scienta.2014.04.024
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Манчадо-Рохо, М., Дельгадо-Бенарроч, Л., Рока, М. Дж., Вайс, Дж., И Эгеа-Кортинес, М. (2012). Количественные уровни Deficiens и Globosa во время позднего развития лепестков демонстрируют сложную топологию транскрипционной сети B-функции. Plant J. 72, 294–307. DOI: 10.1111 / j.1365-313X.2012.05080.x
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Маркес, И., Агилар, Дж. Ф., Мартинс-Лусао, М. А., Мохаррек, Ф., и Фелинер, Г. Н. (2017). Комплексная филогения с тремя геномами и пятью генами луковичного рода Narcissus (Amaryllidaceae) бросает вызов существующим классификациям и выявляет множественные события гибридизации. ТАКСОН 66, 832–854. DOI: 10.12705 / 664.3
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Мол, Ф., Сарджент, С. А., Симс, К. А., Болдуин, Э. А., Балабан, М. О., и Хубер, Д. Дж. (2000). На вкус и аромат томатов влияет температура хранения. J. Food Sci. 65, 1228–1237. DOI: 10.1111 / j.1365-2621.2000.tb10270.x
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Монтеро, Л., Конради, С., Вайс, Х., и Попп, П. (2005). Определение фенолов в пробах озерных и подземных вод с помощью сорбционной экстракции с мешалкой, термодесорбции, газовой хроматографии и масс-спектрометрии. J. Chromatogr. А 1071, 163–169. DOI: 10.1016 / j.chroma.2005.01.097
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Набиха, Б., Абдельфатех, Э. О., Фатен, К., Пол, У. Дж., Мишель, М., и Монсеф, К. М. (2009). Химический состав и антиоксидантная активность эфирного масла цветочных почек Laurus nobilis . J. Essent. Маслоподшипниковые заводы 12, 694–702. DOI: 10.1080 / 0972060X.2009.10643777
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Nagegowda, D. A. (2018). Метаболизм летучих терпеноидов растений: гены биосинтеза, регуляция транскрипции и субклеточная компартментация. FEBS Lett. 584, 2965–2973. DOI: 10.1016 / j.febslet.2010.05.045
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Неджад Эбрахими, С., Хадиан, Дж., Мирджалили, М. Х., Сонболи, А., Юсефзади, М. (2008). Состав эфирного масла и антибактериальная активность Thymus caramanicus на разных фенологических стадиях. Food Chem. 110, 927–931. DOI: 10.1016 / j.foodchem.2008.02.083
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Niinemets, Ü, Kännaste, A., и Copolovici, L. (2013). Количественные закономерности между выбросами летучих веществ растений, вызванными биотическими стрессами, и степенью повреждения. Фронт. Plant Sci. 4: 262. DOI: 10.3389 / fpls.2013.00262
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Ояма-Окубо, Н., Андо, Т., Ватанабэ, Н., Маркези, Э., Учида, К., и Накаяма, М. (2005). Механизм испускания цветочного аромата в Petunia axillaris . Biosci. Biotechnol. Biochem. 69, 773–777.DOI: 10.1271 / bbb.69.773
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Peñuelas, J., and Llusià, J. (2001). Сложность факторов, влияющих на выбросы летучих органических соединений растениями. Biol. Растение. 44, 481–487. DOI: 10.1023 / A: 1013797129428
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Перес-Санс, Ф., Руис-Эрнандес, В., Терри, М. И., Арсе-Гальего, С., Вайс, Дж., Наварро, П. Дж. И др. (2020). Автоматическая классификация конститутивных и неконституционных метаболитов с помощью gcProfileMakeR. bioRxiv [Препринт]. DOI: 10.1101 / 2020.02.24.963058
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Перри Н. Б., Андерсон Р. Э., Бреннан Н. Дж., Дуглас М. Х., Хини А. Дж., МакГимпси Дж. А. и др. (1999). Эфирные масла далматинского шалфея ( Salvia officinalis L.): различия между отдельными людьми, частями растений, временами года и участками. J. Agric. Food Chem. 47, 2048–2054. DOI: 10.1021 / jf981170m
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Пиконе, Дж.М., Клери, Р. А., Ватанабе, Н., МакТавиш, Х. С. и Тернбулл, К. Г. Н. (2004). Ритмичное выделение цветочных летучих из Rosa damascena semperflorens cv. «Quatre Saisons». Планта 219, 468–478. DOI: 10.1007 / s00425-004-1250-5
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Кинтана-Родригес, Э., Рамирес-Родригес, А. Г., Рамирес-Чавес, Э., Молина-Торрес, Дж., Камачо-Коронель, X., Эспарса-Клаудио, Дж. И др. (2018). Биохимические особенности жизненного цикла мексиканской омелы, паразитирующей на биомассе мескитового дерева. Фронт. Plant Sci. 9: 1031. DOI: 10.3389 / fpls.2018.01031
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Рагузо, Р. А., Левин, Р. А., Фуз, С. Е., Холмберг, М. В., и МакДейд, Л. А. (2003). Химия ароматов, ночные ритмы и «синдромы» опыления в Nicotiana . Фитохимия 63, 265–284. DOI: 10.1016 / S0031-9422 (03) 00113-4
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Ранганатан Ю. и Борхес Р.М. (2010). Уменьшение вавилонской связи в изменчивой коммуникации растений: использование леса, чтобы видеть деревья. Plant Biol. 12, 735–742. DOI: 10.1111 / j.1438-8677.2009.00278.x
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Редман П. Б., Доул Дж. М., Манесс Н. О. и Андерсон Дж. А. (2002). Послеуборочная обработка девяти специальных видов срезанных цветов. Sci. Hortic. 92, 293–303. DOI: 10.1016 / S0304-4238 (01) 00294-1
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Рис, А.Р. и Хэнкс Г. Р. (1984). Хранение при очень ранней выгонке нарцисса. J. Hortic. Sci. 59, 229–239. DOI: 10.1080 / 00221589.1984.11515192
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Реми, К. (2004). «Нарцисс в парфюмерии», в г. Нарцисс и нарцисс: Род Нарцисс , изд. Г. Х. Хэнкс (Лондон: электронная библиотека Тейлора и Фрэнсиса), 452–452.
Google Scholar
Руис-Эрнандес, В., Рока, М. Дж., Эгеа-Кортинес, М., и Вайс, Дж.(2018). Сравнение полуколичественных методов, подходящих для определения летучих профилей. Методы растений 14:67. DOI: 10.1186 / s13007-018-0335-2
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Руис-Рамон, Ф., Агила, Д. Дж., Эгеа-Кортинес, М., и Вайс, Дж. (2014). Оптимизация извлечения аромата: дневной свет и возраст цветков влияют на испускание аромата у простых и двойных нарциссов. Ind. Crops Products 52, 671–678. DOI: 10.1016 / j.indcrop.2013.11.034
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Сагаэ, М., Ояма-Окубо, Н., Андо, Т., Маркези, Э. и Накаяма, М. (2008). Влияние температуры на испускание цветочного запаха и профиль эндогенных летучих веществ Petunia axillaris . Biosci. Biotechnol. Biochem. 72, 110–115. DOI: 10.1271 / bbb.70490
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Сантос-Галли, Р., Варгас, П., и Арройо, Дж. (2012). Понимание неогеновой биогеографии Средиземноморья на основе филогенетических взаимоотношений горных и низменных линий Нарцисса (Amaryllidaceae). J. Biogeogr. 39, 782–798. DOI: 10.1111 / j.1365-2699.2011.02526.x
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Шоллерт, М., Кивимяэнпяя, М., Валолахти, Х. М., и Риннан, Р. (2015). Изменение климата изменяет анатомию листьев, но не влияет на выбросы летучих веществ арктических растений. Plant Cell Environ. 38, 2048–2060. DOI: 10.1111 / pce.12530
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Staudt, M., and Lhoutellier, L.(2011). Выбросы монотерпена и сесквитерпена из Quercus coccifera демонстрируют взаимодействующие реакции на свет и температуру. Biogeosciences 8, 2757–2771. DOI: 10.5194 / bg-8-2757-2011
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Sun, H., Zhang, T., Fan, Q., Qi, X., Zhang, F., Fang, W., et al. (2015). Определение цветочного аромата у сортов хризантем и диких родственников методом газовой хроматографии-масс-спектрометрии. Молекулы 20, 5346–5359.DOI: 10,3390 / молекулы20045346
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Тан Ю., Хорикоши М. и Ли В. (2016). ggfortify: единый интерфейс для визуализации статистических результатов популярных пакетов R. Р. Дж. 8: 474. DOI: 10.32614 / RJ-2016-060
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Терри, М. И., Перес-Санс, Ф., Диас-Галиан, М. В., Перес де лос Кобос, Ф., Наварро, П. Дж., Эгеа-Кортинес, М. и др. (2019a). Ген Petunia CHANEL является ортологом ZEITLUPE, координирующим профили роста и запаха. Ячейки 8: 343. DOI: 10.3390 / Cell8040343
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Терри, М. И., Перес-Санс, Ф., Наварро, П. Дж., Вайс, Дж., И Эгеа-Кортинес, М. (2019b). LATE ELONGATED HYPOCOTYL львиный зев играет двойную роль в активации роста цветков и испускания запаха. Ячейки 8: 920. DOI: 10.3390 / Cell8080920
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Титель, З., Левинсон, Э., Фаллик, Э., и Порат, Р. (2012). Важность температуры хранения для сохранения вкуса и качества мандаринов. Postharvest Biol. Technol. 64, 175–182. DOI: 10.1016 / j.postharvbio.2011.07.009
CrossRef Полный текст | Google Scholar
ван Дам, Н. М., и Бауместер, Х. Дж. (2016). Метаболомика в ризосфере: использование подземных химических коммуникаций. Trends Plant Sci. 21, 256–265. DOI: 10.1016 / j.tplants.2016.01.008
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Вердонк, Дж.К., Рик де Вос, К. Х., Верхувен, Х. А., Харинг, М. А., ван Тунен, А. Дж., И Шуринк, Р. К. (2003). Регулирование производства цветочного запаха в петунии, выявленное с помощью целевой метаболомики. Фитохимия 62, 997–1008. DOI: 10.1016 / S0031-9422 (02) 00707-0
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Вити, Р., Андреини, Л., Руис, Д., Эгеа, Дж., Бартолини, С., Якона, К. и др. (2010). Влияние климатических условий на преодоление покоя бутонов абрикоса в двух средиземноморских регионах: Мурсии (Испания) и Тоскане (Италия). Sci. Hortic. 124, 217–224. DOI: 10.1016 / j.scienta.2010.01.001
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Weiss, J., и Egea-Cortines, M. (2009). Транскриптомный анализ реакции на холод в плодах томата определяет дегидрин как маркер холодового стресса. J. Appl. Genet. 50, 311–319. DOI: 10.1007 / BF03195689
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Вайс, Дж., Мюлеманн, Й. К., Руис-Эрнандес, В., Дударева, Н., и Эгеа-Кортинес, М. (2016). Фенотипическое пространство и вариация профилей цветочного запаха во время позднего развития цветка Antirrhinum . Фронт. Plant Sci. 7: 1903. DOI: 10.3389 / fpls.2016.01903
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Йон Ф., Джу Й., Корт Л., Роте Э., Болдуин И. Т., Ким С. и др. (2015). Отключение звука Nicotiana attuata LHY и ZTL изменяет циркадные ритмы цветов. New Phytol. 209, 1058–1066.DOI: 10.1111 / nph.13681
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Юань, Дж. С., Химанен, С. Дж., Холопайнен, Дж. К., Чен, Ф. и Стюарт, К. Н. (2009). Обоняние глобального изменения климата: уменьшение функции летучих органических соединений растений. Trends Ecol. Evol. 24, 323–331. DOI: 10.1016 / j.tree.2009.01.012
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Юань, Ю., Сунь, Ю., Чжао, Ю., Лю, К., Чен, X., Ли, Ф., и другие. (2019). Идентификация цветочных ароматов бородатых ирисов. Молекулы 24: 1773. DOI: 10.3390 / молекулы240
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
роза сорта аскот, шаровидные махровые пурпурно-фиолетовые цветы, белые цветы Фотография, картинки, изображения и сток-фотография без роялти. Image 106169009.
Роза сорт Аскот, шаровидные махровые пурпурно-фиолетовые цветы, белые цветы Фотография, картинки, изображения и сток-фотография без роялти. Изображение 106169009.роза сорт аскот, шаровидные махровые пурпурно-фиолетовые цветки, один в цвету и три бутона, на заднем плане зеленая размытая трава, растение в саду, солнечно, лето,
M L XLТаблица размеров
| Размер изображения | Идеально подходит для |
| S | Интернет и блоги, социальные сети и мобильные приложения. |
| M | Брошюры и каталоги, журналы и открытки. |
| л | Внутренние и наружные плакаты и печатные баннеры. |
| XL | Фоны, рекламные щиты и цифровые экраны. |
Используете это изображение на предмете перепродажи или шаблоне?
Распечатать Электронный Всесторонний
3157 x 2160 пикселей | 26.7 см x 18,3 см | 300 точек на дюйм | JPG
Масштабирование до любого размера • EPS
3157 x 2160 пикселей | 26,7 см x 18,3 см | 300 точек на дюйм | JPG
Скачать
Купить одно изображение
6 кредита
Самая низкая цена
с планом подписки
- Попробуйте 1 месяц на 2209 pyб
- Загрузите 10 фотографий или векторов.
- Без дневного лимита загрузок, неиспользованные загрузки переносятся на следующий месяц
221 ру
за изображение любой размер
Цена денег
Ключевые слова
Похожие изображения
Нужна помощь? Свяжитесь со своим персональным менеджером по работе с клиентами
@ +7 499 938-68-54
Мы используем файлы cookie, чтобы вам было удобнее работать.